雾化吸入前列腺素E1对脂多糖所致大鼠急性肺损伤模型Th1/Th2的影响

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目的探讨雾化吸入前列腺素E1对脂多糖所致大鼠急性肺损伤模型Th1/Th2的影响和PGE1治疗ALI的机制。方法成年雄性健康清洁级Wistar大鼠45只,体重(200±20)g。随机分为生理盐水对照组(NS组,n=5),脂多糖中毒组(LPS组,n=20),雾化吸入前列腺素E1治疗组(PGE1组,n=20)。LPS组及PGE1组于1h、6h、12h和24h4个时点检测。LPS组:每只大鼠尾静脉注射LPS 5mg·kg-1;PGE1组:每只大鼠尾静脉注射LPS 5mg·kg-1半小时后,动物成批置入宽大玻璃瓶内,将PGE1 30μg溶入75ml生理盐水(0.4μg/ml)持续雾化入瓶内,动物吸入PGE1 30min后取出放入笼中自由摄食、饮水及活动,至12h未处死的动物再雾化治疗1次,共2次;NS组:尾静脉注射生理盐水5ml/只。LPS组和NS组雾化吸入生理盐水,方法同PGE1组。取右肺中叶计算肺组织湿干比(W/D)值;取右肺下叶肺组织切片行苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察病理改变;用全自动血细胞分析仪定量分析外周血及支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞(WBC)与多形核中性白细胞(PMN);用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠外周血和BALF中IFN-γ(Th1)、IL-4(Th2)的浓度并计算IFN-γ/IL-4(Th1/Th2)比值。结果(1)肺组织W/D值变化:LPS组肺组织W/D值在6h、12h、24h显著高于NS组,差异有统计学意义(p<0.01)。PGE1组肺W/D值在12h、24h显著低于LPS组(p<0.01)。(2)外周血和BALF中WBC、PMN的变化:LPS组外周血和BALF中WBC、PMN在各时点显著高于NS组,差异有统计学意义(p<0.01)。PGE1组外周血WBC在6h、12h、24h明显低于LPS组(p<0.05)。PGE1组外周血PMN在6h、12h、24h显著低于LPS组(p<0.01)。PGE1组BALF中WBC在各时点显著低于LPS组(p<0.01)。PGE1组BALF中PMN在6h、12h、24h显著低于LPS组(p<0.01)。(3)外周血和BALF中IFN-γ(Th1)、IL-4(Th2)变化和IFN-γ/IL-4(Th1/Th2)比值变化:LPS组外周血及BALF中IFN-γ/IL-4(Th1/Th2)比值较NS组显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。PGE1组外周血IFN-γ(Th1)在12h、24h显著低于LPS组(P<0.01);PGE1组外周血IL-4(Th2)在12h、24h明显高于LPS组(p<0.05);PGE1组外周血IFN-γ/IL-4(Th1/Th2)比值在6h、12h、24h时点显著低于LPS组(P<0.01)。PGE1组BALF中IFN-γ(Th1)在6h、12h、24h显著低于LPS组(P<0.01)。PGE1组BALF中IL-4(Th2)在24h显著高于LPS组(P<0.01)。PGE1组BALF中各时点IFN-γ/IL-4(Th1/Th2)比值显著低于LPS组(P<0.01)。结论采用尾静脉注射LPS成功复制了大鼠ALI的动物模型,LPS可使大鼠外周血和BALF中IFN-γ(Th1)和IL-4(Th2)增加,Th1/Th2比例失衡,而雾化吸入PGE1可使大鼠外周血和BALF中IFN-γ(Th1)相对减少,IL-4(Th2)相对增加,Th1细胞向Th2细胞漂移,从而使Th1/Th2比例趋于平衡,其机制与PGE1减轻PMN在肺内“扣押”而减少炎症损伤,降低肺泡毛细血管膜通透性而减轻肺水肿等有关,提示雾化吸入PGE1可使LPS所致大鼠ALI失衡的Th1/Th2趋于平衡,减轻LPS所致大鼠ALI。
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