超累积植物内生菌LSE01对蔬菜提质增效的影响及机理探究

来源 :南昌航空大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tianyou424
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在兼顾社会粮食需求和实现农业出口发展目标的基础上,一系列农业生产关系的调整和综合生产力的壮大促使化肥、激素等化学投入的比重不断增加。尽管化肥的出现大大减少了土壤耕作,但大规模不合理的使用不仅造成了土壤酸化、养分流失及生态失衡,还带来了癌症、支气管炎等现代性疾病。为保护生态环境和人类免受毒性的影响,以微生物菌肥为主的生产管理方式逐渐成为了化学肥料的良好替代品。然而,许多菌剂肥料的研究仍止步于促生层面,对于全面提高蔬菜营养品质及抗氧化性的研究却微乎其微。因此,本研究以超累积植物龙葵茎内分离出的有促生功能的植物内生菌Bacillus cereus LSE01(LSE01)为生物接种剂,以其作为主要营养源对蔬菜营养品质全面提升的可行性进行了深入探究,并与寄主植物内生菌的促生效果进行了对比,为日后生长促进剂的研究给与了方向性的指导。此外,还利用LC-MS/MS技术对接种后黄豆芽的差异蛋白进行了分析,揭示了LSE01菌剂的吸收机制,为促进蔬菜产量和品质所需的弹性生产系统的发展及探索植物内生菌与宿主植物相互作用的分子机制开辟了新视角。主要研究成果如下:(1)通过盆栽实验验证了LSE01菌剂对蔬菜的促生效果,结果发现接种LSE01使黄豆芽和红叶莴苣各项生长指标均显著提升。总的来说,在6组对照实验中,两种蔬菜处理后的趋势均表现为LSE01>大肠杆菌(E-coli)>LSE01代谢产物(LSE01 M)>大肠杆菌代谢产物(E-coli M)>水处理(C)>LB培养基(LB),且内生菌LSE01能够作为优势菌群以较高的菌种数量定殖于两种蔬菜生长发育的整个生命周期。对于经济效益而言,经LSE01处理后的黄豆芽和红叶莴苣的平均产量分别提高了25.65%和232.32%。相应地,两种蔬菜的平均经济收入也分别从6726(?)/ha和9383(?)/ha增至8439(?)/ha和31182(?)/ha。此外,通过将黄豆芽根茎中分离获得的6株内生菌重新接种至寄主植物种子后发现,大多数寄主植物内生菌对黄豆芽的促生效果存在一定的局限性和抑制性,而对所有生长指标都能够起到积极影响的菌株B1和B2W的促生效果也远逊于LSE01。(2)关于蛋白质、光合色素、酚类化合物等营养物质含量及抗氧化酶活性的实验结果发现,LSE01的施加对营养品质呈现了不同程度的影响。其中对于蛋白质含量的影响最为显著,相比C处理来说,接种后的黄豆芽和红叶莴苣分别增加了133.09%和110.34%。此外,光合色素含量及酚类化合物、维生素C等抗氧化物质水平也均表现出显著的差异性(p<0.05),其中经LSE01处理后的红叶莴苣总叶绿素含量提高了34.38%,黄豆芽和红叶莴苣的维C含量分别增加了55.56%和149.93%。对于总酚和总黄酮含量,两种蔬菜的总体趋势基本均呈LSE01>E-coli≥LSE01 M>E-coli M>C>LB的趋势。同时,LSE01处理后两种蔬菜均表现出较高的抗氧化酶活性,尤其是黄豆芽的超氧化物歧化酶(SOD)和红叶莴苣的多酚氧化酶(PPO)活性影响较大,分别提高了64.55%和49.38%。(3)对接种LSE01后的黄豆芽下胚轴进行了蛋白质组学分析,共查找出1312个差异蛋白表达点,其有52个蛋白的表达发生下调,101个蛋白发生上调。其次,对鉴定获取的蛋白通过了GO和KEGG数据库的比对分析,其中GO注释结果表明,参与的绝大部分差异蛋白体现为生物过程,而翻译过程(Translation),核糖体的组成构建过程(Structural constituent of ribosome,r RNA binding,ribosome)等生物学过程与蔬菜蛋白质的合成息息相关。此外,光合作用相关蛋白所占比例较大,这直接影响了蔬菜发育、营养物质的供应及光合色素含量。另一方面,通过KEGG数据库共检索到了54条不同的代谢途径,这些代谢通路的富集对促进细胞伸长、提高抗氧化水平及促进蛋白质等营养物质的合成起到了积极的影响。(4)以1/4霍格兰营养液和去离子水为基础培养基,选取黄豆芽、绿豆芽、黑豆芽和小麦草四种芽苗菜进行了普适性的初探。通过对生长指标及形态分析发现,接种了LSE01的两组均显现出较为明显的促生效果,其中LSE01+H(LSE01+霍格兰营养液)的产量最为突出稳定,但对于黄豆芽和绿豆芽来说,该条件下伴随的死亡数也有所增长。另外,实验以蛋白质含量指标为代表进一步探究了微生物菌剂对不同芽苗菜品质的影响。结果表明,除小麦草外,接种LSE01的四种芽苗菜的蛋白质含量均出现了较为显著的提升,其中经LSE01+C(LSE01+水处理)处理的黑豆芽蛋白质含量比C+C(空白对照)处理高出约5.48倍。但LSE01+H条件下培养的植物容易受品种及植物自身抗性等外界因素影响,相比之下,LSE01+C培养条件对蔬菜蛋白质含量的积极作用更为稳定且具备更为广泛的普适性。
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