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双液相生物催化体系经常被用于全细胞生物转化,可解决底物和产物在水相中溶解度低的问题。然而,被用做为第二相的大多数有机溶剂对细胞的生物催化活性具有毒性。离子液体具有较高分配系数及绿色环保等优点,成为替代有机溶剂构建双液相体系最有前途的分配相。本项目以雷斯青霉(Penicillium raistrickii)生物催化左旋乙基甾烯双酮15α羟基化为研究模型,结合离子液体的生物相容性及分配系数等,研究了离子液体/水双液相生物催化体系在雷丝青霉15α羟基化左旋乙基甾烯双酮中的应用。利用孢子存活率、抑菌圈及葡萄糖消耗量等指标研究离子液体对于雷斯青霉的生物相容性,结果表明,对于丝状真菌,葡萄糖消耗量是检测离子液体生物相溶性比较可靠的实验手段,所选四种离子液体对雷斯青霉代谢活性的影响大小为[HMIm][NTf2]>[HMIm][PF6]>[BMIm][PF6]>[BMIm][NTf2]。建立离子液体双液相生物催化体系,研究不同离子液体对于甾体转化效率的影响。结果表明：与纯水相及离子液相／发酵液双液相相比,[BMIm][NTf2]/磷酸缓冲液(pH6.5)双液相体系能够显著提高生物催化效率。之后分别构建[BMIm][NTf2]/磷酸缓冲液和[BMIm][PF6]/磷酸缓冲液双液相体系,研究磷酸缓冲液相的pH、两相体积比、菌体重量及底物投料量等参数对于甾体生物催化效率的影响,结果表明：利用[BMIm][NTf2]/磷酸缓冲液(pH6.5)和[BMIm][PF6]/磷酸缓冲液(pH5.8)双液相转化体系进行左旋乙基甾烯双酮的羟基化,转化率分别为70.21%和61.37%。通过多次萃取分别对上述两种双液相体系中的离子液体进行回收,并利用回收后的离子液体进行四次甾体生物催化,转化率分别达到55.26%和50.13%。本研究表明离子液体双液相在甾体生物催化中具有较好的应用效果。