目的:近年来的研究认为,大麻素1型受体(type-1 cannabinoid receptor,CBR1)和肝型脂肪酸结合蛋白(FABP1)的活性与脂肪肝、肝硬化以及肝癌的发生发展密切相关,但其在慢性肝病发展中的作用尚不清楚。因此,本研究拟采用CCL4致大鼠肝纤维化模型,观察联苯双酯的肝脏保护作用是否和调节CBR1和FABP1在肝脏的表达有关。该实验可对理解肝纤维化的发生发展机制提供新思路,为临床早期检测化学性肝损伤提供新的靶标。方法:1大鼠CCl4肝纤维化模型的建立和联苯双酯的治疗作用取Wistar大鼠30只,随机分为3组,空白对照组、四氯化碳模型组、联苯双酯滴丸2 mg/kg组,各组均为10只。于模型制备时就开始给药,一天一次,连续6周。空白对照组和模型组给予0.5%羧甲基纤维素钠,联苯双酯组给予2mg/kg的联苯双酯灌胃,灌胃容积均为1ml/100g体重。模型组和联苯双酯组皮下给予四氯化碳花生油溶液(40%,首剂0.5ml/100g,以后则改用0.3ml/100g),每周2次,对照组皮下给予等量花生油溶液。CCl4组和联苯双酯组动物在给予CCl4次日饮用乙醇水,对照组饮用灭菌水。给药6周三组均停止给予四氯化碳或花生油。联苯双酯或纯水继续灌胃给予2周。2大鼠生化指标检测8周后,将大鼠麻醉,腹主动脉取血并常规分离血清,备血清中AST、ALT、TP及ALB的测定。3肝脏形态学观察取血完毕,将动物处死,取出肝脏并称重,计算肝脏系数。将部分肝组织固定并行HE染色和Masson染色。4羟脯氨酸的含量测定取部分肝组织制成匀浆,备肝组织中羟脯氨酸的含量测定。5肝组织中FABP1和CBR1的表达采用免疫组织化学法检测石蜡切片中FABP1,CBR1在各组肝组织的表达。并采用Western blot的方法进行FABP1、CBR1的半定量分析。结果:1肝重量的改变与对照组相比,模型组肝系数较高,联苯双酯组肝脏系数较模型组明显下降,但仍高于对照组。2大鼠生化指标模型组AST和ALT较对照组显著升高,ALB及TP较对照组为低。与模型组相比,联苯双酯组可显著降低血清中AST和ALT水平,使血清中AST和ALT基本恢复正常。相对于模型组,联苯双酯组有升高TP和ALB的趋势,但未见统计学显著性。3肝脏大体解剖学观察对照组大鼠肝脏表面光滑;模型组大鼠肝脏表面粗糙;联苯双酯组大鼠肝脏表面未见明显颗粒状物质。4肝脏组织病理学HE染色显示,模型组正常肝小叶结构破坏,肝组织内可见变性、坏死、炎细胞浸润及纤维组织增生。联苯双酯组小叶结构基本清晰,肝细胞的变性、坏死及炎细胞浸润现象较模型组明显减轻,汇管区仍可见少量纤维增生。Masson染色显示,模型组肝组织表面凹凸不平,有不同程度的胶原纤维增生以至假小叶形成。联苯双酯组可见肝组织间胶原纤维的延伸,但无明显的假小叶结构。5肝组织中羟脯氨酸的含量与对照组相比,模型组肝组织中羟脯氨酸含量有显著升高的趋势。与模型组相比,联苯双酯组羟脯氨酸的含量下降,但仍高于对照组。6大鼠肝脏组织FABP1的表达变化对照组肝组织FABP1常规表达于肝细胞的胞浆。和对照组相比,模型组FABP1表达量明显下降。给予联苯双酯处理后,FABP1的表达较模型组明显增加,但仍低于对照组。7大鼠肝脏组织CBR1的表达变化对照组CBR1几乎未见表达。模型组CBR1阳性表达明显升高,主要出现于肝脏间质细胞(枯否氏细胞或星型细胞),而在肝细胞和血管内皮细胞未见表达。给予联苯双酯后CBR1的表达较模型组明显减少,但仍高于对照组。结论:1 CCl4联合酒精长期应用可致大鼠出现肝纤维化,使FABP1表达减少,而CBR1的表达增强;2联苯双酯对CCl4联合酒精诱发肝损伤的保护作用和增强肝组织FABP1的表达和抑制CBR1表达有关。