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用14头50日龄，体重为15kg±1kg的雄性“军牧一号”仔猪进行冷应激试验来探讨HSP70及其mRNA随着应激时间的变化而发生变化的规律及两者之间的相关关系。仔猪正常饲养温度为18℃。试验前和期间自由采食和饮水，在-5℃～-10℃进行冷应激刺激。采样时间分别为应激0h，0.5h，3h，6h，12h，24h，应激恢复0.5h，3h，6h，12h，24h，48h共12个时间点进行采样。在每个时间点各屠宰一头猪，取肝脏、脾脏和股二头肌样品并迅速置于液氮中保存；每个时间点前腔静脉各取抗凝血10mL，并迅速分离淋巴细胞，置于-84℃超低温冰箱冷冻保存。
本试验采用免疫印迹和实时定量RT-PCR方法检测应激前后不同时间仔猪肝脏、脾脏、肌肉和淋巴细胞中HSP70的表达量及其mRNA的转录量，并采用放射免疫分析法测定应激前后不同时间血清中激素浓度，试验数据均用SPSS软件统计分析。结果如下：(1)正常状态下，HSP70有一定的基础表达量，应激0.5h，淋巴细胞内HSP70的表达水平迅速升高(p＜0.05)，但随之逐渐下降。虽有波动趋势，但变化并不显著(p＞0.05)。应激6h，12h的HSP70的表达量与原始基础量差异极显著(p＜0.01)。应激恢复6h，HSP70的表达量又逐渐上升(p＜0.05)，至应激恢复24h后，表达量降到接近于基础量水平。仔猪肝脏、脾脏和肌肉中HSP70的表达量都以不同的速度升高，而后呈现与淋巴细胞相似的变化趋势。(2)在正常状态下仔猪肝脏、脾脏、肌肉和淋巴细胞中HSP70mRNA有一定的基础转录量；冷应激0.5h，淋巴细胞内HSP70mRNA转录量也迅速升高(p＜0.05)。冷应激3h，转录量下降但冷应激6h稍微上升。HSP70mRNA丰度在应激6h上升到一定程度后呈不断下降的趋势。直到应激恢复3h，转录量呈上升趋势，到应激恢复24h，已经达到峰值，到48h下降到基础量水平。肝脏、脾脏、肌肉HSP70mRNA的总体变化趋势与淋巴细胞HSP70mRNA相同。(3)血清促肾上腺皮质激素浓度呈现先逐渐上升再下降的趋势，但变化不明显(p＞0.05)。血清皮质醇浓度在应激前后变化比较明显。应激0.5h，血清皮质醇浓度迅速升高(p＜0.05)。随后逐渐下降，到应激恢复0.5h，血清皮质醇浓度与应激3h相比差异显著(p＜0.05)；与应激6h比较差异极显著(p＜0.01)。甲状腺激素分游离和结合型激素，其浓度变化曲线都呈先升高后降低的趋势，血清中FT3与FT4的浓度变化与基础浓度比较差异显著(p＜0.05)，而T3和T4浓度变化不明显(p＞0.05)。
试验结果证明：(1)冷应激可以诱导HSP70的表达及其mRNA转录量增加，并且随应激时间的不同呈现有规律的变化。(2)冷应激对仔猪血清中六种激素浓度的影响复杂，但呈现有规律的变化，其中血清中皮质醇、FT3与FT4浓度变化显著。
结论：1.HSP70或HSP70mRNA可作为监测动物机体应激程度的指标。2.血清中皮质醇、FT3与FT4浓度可作为辅助应激程度评估的参考指标。