牛鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)是牛的重要传染病原;牛感染牛鼻气管炎病毒可引起牛鼻气管炎(Infectious bovine rhinotracheitis,IBR),给养牛业造成重大经济损失。接种疫苗能极大降低IBR发病率,是目前最经济有效的预防和治疗方案。在疫苗的实际生产中国外企业多采用生物反应器来培养细胞以提高细胞密度和疫苗产量。而国内的多数疫苗企业在疫苗生产中仍然采用低效的转瓶培养方式生产疫苗,疫苗产量、质量上处于劣势,这极大的限制了我国疫苗产业的发展壮大。随着分子生物学技术的发展,科学家开始探索病毒与宿主细胞相互作用的背后机理,促进病毒感染和复制过程,提高病毒滴度。低温等离子体技术在菌种诱变和癌症治疗中展现的巨大作用而为人们所熟知,其背后巨大的应用潜能仍待发掘。本研究以提高IBRV在牛肾细胞(Madin-Darby Bovine Kidney,MDBK)中的滴度为目的,探究了等离子体处理对IBRV在MDBK细胞中复制的影响,主要研究成果如下:(1)IBRV快速检测方法的建立,建立了IBRV的煮沸检测法。该方法在煮沸时间10-30 min内检测结果间无显著差异,且检测结果重复性优于柱纯化试剂盒;(2)测定了等离子体的不同处理时间对IBRV产量的影响,确定等离子体最佳处理时间为2 min,比较了等离子体分别处理细胞、病毒和同时处理两者的效果,确定了等离子体处理的最佳方式为同时处理;(3)对等离子体不同处理方式造成不同现象的原因进行了初步探索:证实了等离子体处理能够提高IBRV的感染能力,促进IBRV进入MDBK细胞的过程;同时也证实等离子体处理能够抑制MDBK细胞的吞噬作用并提高MDBK细胞中干扰素IFN-α的表达量;同时证明等离子体的活性氧成分只是其起作用的一部分原因,不能完全代替等离子体的作用;等离子对病毒复制的促进作用具有一定的特异性;(4)为探究牛α-干扰素对IBRV的抑制作用,利用谷氨酸棒杆菌表达系统成功表达了牛α-干扰素。该重组蛋白对IBRV在MDBK细胞中的增殖具有很好抑制作用。