【摘 要】
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本研究以10种常用农药（多菌灵、百菌清、异菌脲、吡唑醚菌酯、甲氰菊酯、甲维盐、毒死蜱、吡虫啉、啶虫脒、噻虫嗪）作为分析对象,建立了简化QuEChERS方法联合胶体金免疫层析技术,应用于茶叶、草莓、杨梅样品中上述10种农药残留的同步快速检测。主要研究结果如下：
1.通过甲维盐人工抗原制备、小鼠免疫以及杂交瘤细胞筛选，获得了识别甲维盐的高灵敏度单克隆抗体。通过间接竞争ELISA法测试该单抗识别甲维盐的灵敏度（IC50）达43.67ng/mL，经表面等离子共振技术（SPR）进行抗体亲和力测定，平衡解离
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本研究以10种常用农药（多菌灵、百菌清、异菌脲、吡唑醚菌酯、甲氰菊酯、甲维盐、毒死蜱、吡虫啉、啶虫脒、噻虫嗪）作为分析对象,建立了简化QuEChERS方法联合胶体金免疫层析技术,应用于茶叶、草莓、杨梅样品中上述10种农药残留的同步快速检测。主要研究结果如下：
1.通过甲维盐人工抗原制备、小鼠免疫以及杂交瘤细胞筛选，获得了识别甲维盐的高灵敏度单克隆抗体。通过间接竞争ELISA法测试该单抗识别甲维盐的灵敏度（IC50）达43.67ng/mL，经表面等离子共振技术（SPR）进行抗体亲和力测定，平衡解离常数为1.24×10-9M。
2.基于胶体金免疫层析技术，利用十种不同的农药抗原抗体,分别研制了十种金标速测试纸条。在最适反应条件下，方法针对目标分析物的视觉检出限分别为甲氰菊酯：0.50mg/L；毒死蜱：0.10mg/L；吡虫啉：0.0025mg/L；多菌灵：0.05mg/L；噻虫嗪：0.0005mg/L；啶虫脒：0.01mg/L；百菌清：0.012mg/L；异菌脲：0.10mg/L；吡唑醚菌酯：0.10mg/L；甲维盐：1mg/L。
3.针对提取剂与净化剂的种类及用量、提取方式、反应时间等进行条件优化，开发了适用于茶叶样本（红茶、绿茶、乌龙茶）及浆果样品（草莓、杨梅）的简化QuEChERS前处理方法。与传统QuEChERS方法相比，本文构建的样品快速处理方法时间缩短了60%以上。采用本研究制备的金标速测试纸条进行实际样品检测，茶叶样品中各农药的视觉检出限为0.005~5mg/kg；草莓、杨梅样品中视觉检出限为0.005~2.50mg/kg，基本能满足我国相应的最大残留限量的检测要求，且整个分析流程在30min以内。经仪器法对比验证，速测法的相对准确率大于96.70%。该方法可信度高，适用于室外现场快速诊断。
本研究开发的简化QuEChERS方法联合胶体金免疫层析技术，具有检测速度快、操作简便、稳定性高等优点，可用于农产品中甲维盐等十种农药残留的快速筛查，具有良好的应用推广价值。
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