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目的:观察在脉冲时间依赖的刺激(Spike-timing-dependent plasticity,STDP)诱导模式下单眼形觉剥夺对小鼠视觉发育关键期内初级视皮层V1B区突触可塑性的影响及其机制的研究。方法:选择健康C57BL/6小鼠,雌雄不限,随机分为:(1)正常对照组(P21)14只,(2)单眼形觉剥夺组,右眼缝合3天(P21)14只。制备400μM的视皮层脑片,采用可视化膜片钳全细胞模式记录C57BL/6小鼠正常组(P21)、单眼剥夺3天(P21)组(含剥夺侧皮层、非剥夺侧皮层)视皮层V1B区脑片Ⅱ-Ⅲ层锥体神经元兴奋性突触后电位(excitatory postsynaptic potential,EPSP)及兴奋性突触后电流(excitatory postsynaptic current,EPSC)。应用p Clamp 10(Molecular device,LLC)软件进行数据采集,分析及作图。采用SPSS11.0统计软件进行统计学处理,计量资料统一使用均数±标准误表示。结果:1正常饲养组小鼠视皮层STDP整合时间窗的变化(1)正常饲养组小鼠视皮层V1B区Ⅱ-Ⅲ层锥体神经元予间隔ΔtPre-Post=10ms刺激后EPSP反应增加,可成功诱导t LTP,但当ΔtPre-Post=100ms则未能诱导LTP(Δt=+10ms:124.1±3.9%,n=9,7;Δt=+100ms:100.4±3.3%,n=10,7;p<0.001)。(2)分别给予正常饲养组小鼠V1B区Ⅱ/Ⅲ层锥体神经元间隔Δt=-10ms的刺激后可成功诱导LTD,而间隔为Δt=-100ms时不能诱导出LTD(Δt=-10ms:76.5±3.5%,n=9,7;Δt=-100ms:101.2±1.5%,n=10,7;p<0.001)。(3)正常饲养组小鼠视皮层STDP整合时间窗为-100ms+50ms。2单眼形觉剥夺组小鼠视皮层STDP整合时间窗的变化2.1单眼形觉剥夺组小鼠剥夺侧视皮层STDP整合时间窗的变化(1)单眼剥夺组小鼠剥夺侧初级视皮层分别给予ΔtPre-Post=10ms,100ms的STDP条件刺激均可诱导出LTP(Δt=+10ms:130.8±1.7%,n=8,5;Δt=+100ms:114.7±0.3%,n=7,5;P<0.001)。(2)单眼剥夺组小鼠剥夺侧视皮层Ⅱ/Ⅲ层锥体神经元在间隔分别为Δt=10ms,100ms的STDP刺激下均可诱导出LTD(Δt=-10ms:74.8±0.77%,n=8,5;Δt=-100ms:92.5±0.67%,n=7,5;P<0.001)。(3)单眼剥夺组小鼠剥夺侧初级视皮层STDP整合时间窗为-200ms+200ms。2.2单眼剥夺组小鼠非剥夺侧视皮层STDP整合时间窗的变化(1)单眼剥夺非剥夺侧视皮层分别给予ΔtPre-Post=10ms,50ms的STDP条件刺激诱导出t LTP(Δt=+10ms:129.6±1.5%,n=8,5;Δt=+50ms:120.5±0.9%,n=8,5),而当ΔtPre-Post=100ms时,未能诱导t LTP(Δt=+100ms:101.1±0.6%,n=7,5)。(2)单眼形觉剥夺3天组小鼠非剥夺侧视皮层分别给予Δt=-10ms的STDP条件刺激可以诱导出LTD,而在Δt=-100ms时则不能成功诱导LTD(Δt=-10ms:79.8±0.79%,n=8,5;Δt=-100ms:99.6±0.89%,n=8,5)。(3)单眼剥夺组小鼠非剥夺侧初级视皮层STDP整合时间窗为-100ms+100ms。3单眼形觉剥夺对关键期内初级视皮层STDP可塑性影响的内在机制的研究。单眼剥夺3天组与正常组相比NMDAR-EPSC衰减时程延长[τw(ms):MD:149.10±7.3%n=8,4;NR:99.9±6.8%n=8,4];使用Ifenprodil阻断NR2b受体,可以使单眼剥夺3天组电流衰减时程的延长作用减弱[τw(ms):MD:93.59±3.11%n=8,4;NR:89.23±3.9%n=8,4];Ifenprodil还能够降低电流的强度,这种作用在单眼剥夺3天组的视皮层中更为显著[p A MD:58.1±3.5%n=8,4;NR:31.6±3.9%n=8,4]结论:1单眼形觉剥夺3天改变剥夺侧与非剥夺侧初级视皮层V1B区Ⅱ/Ⅲ层锥体神经元STDP整合时间窗,剥夺侧视皮层STDP整合时间窗由正常-100 ms+50ms延长至-200 ms+200 ms,而非剥夺侧视皮层STDP整合时间窗与正常视皮层时间窗基本相近,提示单眼形觉剥夺后小鼠视皮层可塑性发生了变化。2单眼剥夺组小鼠突触后NMDAR-EPSC电流衰减时程相对延长,NR2B介导电流幅度相对增加、时程增强,提示单眼形觉剥夺小鼠视觉发育关键期内初级视皮层STDP再可塑性变化内在机制可能与NR2B介导电流幅度相对增加及时程增强有关。