B细胞特异的莫洛尼白血病毒插入位点1（ B cell-specific moloney murine leukemiavirus insertion site1，BMI-1）是1991年荷兰研究中心在鼠淋巴细胞中发现的多梳基因家族（ polycomb groupgenes，PcG）中的重要调节基因。BMI-1的异常表达广泛存在前列腺癌[1]，鼻咽癌[2]，乳腺癌[3]，造血干细胞[4]，神经干细胞[5]等多种细胞当中。下调 Bmi-1的表达可抑制肿瘤细胞的生长和成瘤能力,提示Bmi-1可能参与肿瘤的形成。研究 Bmi-l在肿瘤的发生，转移，预后中的作用及机制正成为目前研究的的热点。　　乳腺癌是女性排名第一的常见恶性肿瘤。2011年美国CA:A Cancer Journal for Clinicians杂志(2010年影响因子94.262)公布的最新统计数据显示，美国2011年估计有230480例女性罹患乳腺癌，占女性新发恶性肿瘤的30％，排名女性恶性肿瘤发病率第一位。在我国北京、上海、天津等大城市的统计显示乳腺癌同样是我国女性最常见的恶性肿瘤，且发病率呈逐年上升趋势。现有研究已表明Bmi-l在乳腺癌中高表达，且与雌激素受体阳性，淋巴结转移有关，这表明Bmi-l与乳腺癌的进展、转移密切相关[6]。Bmi-l的高表达能引起人乳腺上皮细胞恶性转化，这可能是Bmi-l在乳腺癌的过度表达引起了乳腺上皮细胞端粒酶的调控改变。宫颈癌是全球妇女中次于乳腺癌和结直肠癌的第三常见的恶性肿瘤，其中85%新发病例在发展中国家，是发展中国家是仅次于乳腺癌居第二位常见的恶性肿瘤，也是最常见的女性生殖道恶性肿瘤。现有研究显示宫颈癌组织中Bmi-l蛋白的高表达与患者年龄、肿瘤病理分型无关，而与肿瘤分级、病理分期等因素密切相关，推测宫颈癌组织中Bmi-l的高表达也是判断肿瘤发生发展、浸润、预后的有效指标之一[7]。　　目前基因治疗正逐渐成为研究的热点并显示出对癌症良好的治疗前景，RNAi技术正是基因特异性治疗的热门技术。而且现有大量研究均表明Bmi-l在乳腺癌，宫颈癌中表达异常，但其作用机制众说纷纭，尚未完全清楚。故本文在前人基因芯片筛查结果的基础上取了多个与细胞周期、肿瘤发生发展过程相关的基因，利用siRNA靶向沉默Bmi-l基因，由于HEK293细胞极少表达细胞外配体所需的内生受体，且比较容易转染，在本实验中用于初步筛选Bmi-l的有效siRNA，随后再同样干扰宫颈癌细胞Hela，乳腺癌细胞MCF-7中Bmi-l的表达，进一步筛选出Bmi-l的下游基因，为进一步研究Bmi-l在妇科肿瘤进程中的作用机制奠定基础。　　[目的]筛选出有效干扰 Bmi-1表达的 siRNA转染肾胚细胞HEK293，宫颈癌细胞 Hela，乳腺癌细胞 MCF-7。检测其对 TGF-β，Hey1，Hes1，Bmp7，Smad3，Casp3，Casp6等基因的表达影响，寻找乳腺癌，宫颈癌中Bmi-1的靶基因,为进一步研究Bmi-1及下游基因的作用机制奠定基础。　　[方法]用Lipofectamine RNAiMAX转染试剂顺式转染法将 siRNA转染 HEK293，MCF-7，Hela细胞，实时荧光定量RT-PCR方法检测转染前后HEK293，MCF-7，Hela细胞中TGF-β，Hey1， Hes1，Bmp7，Smad3，Casp3，Casp6基因的表达变化，对有变化的基因用Western blot在蛋白水平进一步验证。　　[结果]在HEK293，MCF-7， Hela细胞中敲减Bmi-1的表达对Hey1，Hes1，Bmp7的表达无明显影响，却可引起TGF-β表达上调，Smad3，Casp3，Casp6基因表达下调。　　[结论]沉默Bmi-1的表达可引起HEK293，MCF-7，Hela细胞中TGF-β， Smad3，Casp3，Casp6的表达量均有不同程度的改变，Bmi-1基因可能是作用于 TGF-β/Smads信号通路，而在宫颈癌，乳腺癌的发生发展中起作用。