论文部分内容阅读
本试验选取日本对虾为研究对象,通过研究饲料中添加不同水平Ala-Gln对日本对虾血清生化指标、肝胰腺细胞凋亡率和肠道粘膜形态的影响,探索Ala-Gln对日本对虾免疫功能、肠道结构等健康状况的改善作用,为Ala-Gln在对虾饲料中的开发利用提供科学依据。试验选用240尾体长为9-10cm的健康日本对虾,随机分为4组,每组设3个重复,每个重复20尾。四组分别饲喂：基础饲料(0%Ala-Gln)、基础饲料添加0.25%Ala-Gln、基础饲料添加0.5%Ala-Gln和基础饲料添加1.0%Ala-Gln。每组均饲养于60cm×45cm×30cm水簇箱中,底部铺沙6cm；水温25±1℃,pH7.9±0.2,日换水二分之一,晚间投料三次,预试期5天,试验期为16天。饲养试验前后称取每组平均体重,试验结束时,制备血清、肝胰腺和肠道样本,分析测定相关指标。获得以下主要结果：1、Ala-Gln对日本对虾血清生化指标的影响试验结果表明,除了添加1.0%Ala-Gln能显著增加日本对虾血清中的TP含量外(P<0.05),其余各组血清中的TP、PA、BUN和TC含量无差异,但随Ala-Gln添加量的提高,血清中的TP、PA、BUN和TC含量等各项蛋白质代谢指标均呈现增加趋势,表明Ala-Gln有利于增加日本对虾的蛋白质合成。添加Ala-Gln能显著增加日本对虾血清中PO、LSZ、ACP的含量(P<0.05),添加0.5%和1.0%的Ala-Gln能显著增加SOD和ALP含量(P<0.05),血清PO、LSZ、SOD、ALP、ACP和LDH含量等各项免疫相关指标均随Ala-Gln添加量提高而呈现增加趋势,表明Ala-Gln能加强虾体的非特异性免疫功能,提高机体的免疫作用。2、Ala-Gln对日本对虾肝胰腺细胞凋亡率的影响本试验摸索建立日本对虾肝胰腺单细胞悬液的制备方法和培养条件,确立酶解、最适pH、最佳离心速率等基本条件,建立了流式细胞技术测定日本对虾肝胰腺细胞凋亡率的基本方法,为进一步的研究奠定了基础。试验结果：添加不同水平的Ala-Gln均可显著降低日本对虾肝胰腺细胞凋亡率(P<0.05),并且随着Ala-Gln添加水平的升高,日本对虾肝胰腺细胞凋亡率逐渐降低,表明添加Ala-Gln有利于肝胰腺健康,改善虾体健康状况。3、Ala-Gln对日本对虾肠道粘膜形态的影响添加1.0%的Ala-Gln可以显著增加日本对虾肠绒毛高度(P<0.05),增加肠道粘膜厚度,改善肠结构,表明1.0%的Ala-Gln对日本对虾肠道有良好的营养作用。综合日本对虾的各项蛋白质代谢、免疫相关指标,发现饲料中添加适量Ala-Gln能显著提高日本对虾血清中的溶菌酶、抗氧化酶及磷酸酶活性,降低肝胰腺细胞凋亡率,显著增加小肠绒毛高度,有利于维持肠道结构和功能的完整,改善虾体健康状况,从而提高对虾抵御病害的能力,对实际生产有一定的指导意义。但其作用机制、最适添加量仍有待进一步研究。