论文部分内容阅读
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)污染粮食作物的现象非常普遍,广泛存在于大麦、玉米、小麦等农作物。目前,世界范围内DON污染居各种生物毒素之首,属于严重污染。本研究主要目的采用时间分辨荧光免疫分析(Time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)技术建立检测DON高灵敏的分析技术。论文的主体部包括以Eu3+为标记物建立DON-TRFIA免疫检测法及Eu3+/Sm3+为标记物建立DON/ZEN双标记TRFIA。首先建立DON-TRFIA免疫检测法并对其进行严格的考核。DON-TRFIA灵敏度为0.01ng/mL,检测范围为0.01~100ng/mL,批内、批间变异率均<10%。不同样品的添加回收率符合免疫分析方法平均回收率在70%~130%之间。玉米样品检测结果表明DON-TRFIA与商品化DON-ELISA试剂盒结果高度相关。在DON-TRFIA工作的基础上,以Eu3+/Sm3+为标记物建立了快速、灵敏、可靠的DON/ZEN双标记TRFIA。双标记DON/ZEN-TRFIA的灵敏度为:DON为0.194ng/mL、ZEN为0.73ng/mL。测量范围为:DON 0.194~100ng/mL、ZEN 0.73~50ng/mL。最后初步建立了DON光激化学发光免疫检测法(DON-LICLIA),并简要的考核DON-LICLIA的稳定性、样品添加回收率等。DON-LICLIA两步共30min的反应模式缩短了检测时间,批内批间变异率均<5%。检测范围为0.007~100ng/mL,灵敏度为0.007ng/mL。研究表明,DON-TRFIA是目前已报道文献中最灵敏的DON免疫检测法,具有很好的应用前景。本论文对DON的TRFIA以及新兴的光激化学发光检测技术进行了比较全面的探讨,为我国这一领域以及相关领域的研究提供了有价值的参考资料。