枣树（Ziziphus jujuba Mill.）已经发展成为我国第一大干果树种，快速发展的枣产业，迫切需要换代型品种。但枣树杂交育种难度大，芽变选种费时费力，因此人们开始尝试其它的育种方法，如多倍体育种等。本课题组前期在田间愈伤组织诱导及芽再生技术体系基础上，建立了免嵌合体纯化的多倍体诱导技术并创制了20余个枣品种和酸枣类型的纯合多倍体种质。本研究拟开展田间愈伤组织诱导和芽再生技术体系在原位遗传转化、EMS诱变等中的应用研究，以期为免嵌合体纯化的转基因育种、诱变育种等奠定基础。主要研究结果如下：1.枝条粗度对芽再生有一定的影响。分别对粗度1.0-2.5cm的枝条进行了愈伤组织诱导和芽再生研究，随着枝条的增粗，出芽数随之增多，2.0-2.5cm的枝条出芽数显著增高，但考虑到较粗枝条的数量较少且对树体伤害较大，因此认为适宜的枝条粗度为1.5-2.0cm，对树体伤害小，芽再生能力强。2.发根农杆菌的侵染时期影响‘大荔龙枣’枝条截面愈伤组织诱导和芽再生能力。分别在截枝后的第1d、4d、7d、10d进行侵染，侵染后，愈伤组织的生长短暂受抑，第20d后各处理间的愈伤组织生长量差异不大；在截枝后7d之内进行侵染，芽再生能力强，但没有获得转化芽。3.根癌农杆菌菌液浓度影响‘月光枣’枝条截面愈伤组织诱导、芽再生能力及转化效率。菌液浓度（OD600）在0.4-1.2范围内对枝条截面愈伤组织量没有显著影响；截枝后20d，菌液浓度为0.8的处理出芽数最多，但30d时各处理出芽数与对照之间均无显著差异，说明菌液可在前期影响愈伤组织出芽，但并不会影响最终的出芽数。本研究在菌液浓度为0.4时获得了2个转化芽，观察发现，转化芽生长矮小，长势较弱，这可能是由于农杆菌的侵染影响了枝条的生长发育。4.根癌农杆菌侵染时间对‘月光枣’枝条截面愈伤组织诱导、芽再生能力的影响不显著。侵染时间分别为12h、24h、36h和48h时，愈伤等级及出芽数均无显著差异。5.根癌农杆菌的侵染次数影响‘月光枣’枝条截面愈伤组织诱导、芽再生能力及转化效率。愈伤组织诱导后第10d，侵染3次较侵染2次或1次的愈伤组织等级低，并且也低于对照；愈伤组织诱导后第20d，不同侵染次数愈伤组织等级差异不明显，但有随着侵染次数的增多而降低的趋势。愈伤组织诱导后第20d，出芽数随着侵染次数的增多而降低，侵染1次的出芽数与对照差异不显著，但却显著高于侵染2次或3次的出芽数。愈伤组织诱导后第30d，不同侵染次数的出芽数差异均不显著。本试验也未获得转化芽，因此从利于出芽及省时方面考虑，侵染1次为宜。6.利用田间愈伤组织诱导和芽再生技术对4个优良鲜食枣品种（‘无核丰’、‘京枣39’、‘冷白玉’、‘六月鲜’）进行了秋水仙素诱变。获得了‘京枣39’的三倍体和二、四嵌合体。7.利用田间愈伤组织诱导和芽再生技术对‘月光枣’进行了不同浓度（0.1%、0.3%、0.5%、0.7%和1.0%）的EMS诱变，结果发现，磷酸缓冲液(PBS)和EMS都会对愈伤组织和出芽产生伤害，再生芽的变异情况需进行进一步观察。