虫霉目中有30余种侵染蚜虫的寄主专化性和非专化性病原真菌,是蚜虫生物防治的重要资源。本研究较系统地研究了蚜科专化的努利虫疠霉(Panodra nouryi),重点揭示其休眠孢子形成机制和野外流行潜能,并研制出黍米凝胶和黍米海藻酸盐两种颗粒剂。主要结果摘要如下：努利虫疠霉休眠孢子的形成机制努利虫疠霉是侵染蚜虫的虫疠霉中唯一可产休眠孢子的病原真菌,有利于在寄主匮乏季节的宿存。为揭示休眠孢子在寄主体内形成的机制,将饲养于甘蓝叶圆片上的桃蚜(Myzus persicae)若蚜群(40-60头／叶)接种努利虫疠霉初级分生孢子,接种浓度(C)从数个到接近2000个孢子/mm2,并在10-25℃(T)和8-16 h日光照(HL)组合条件或自然温光条件(17.5±3.1℃,13L：11D)下饲养。每个温光处理包含36-83个不同接种剂量的蚜群,并在7-11天饲养期内观察各蚜群的死亡率和产休眠孢子的蚜尸比例。结果表明,各温光处理的蚜虫死亡率与接种剂量均呈现典型的S形变化趋势,并拟合逻辑斯蒂方程(0.79≤r2≤0.88),半致死浓度(剂量)LC50值(1.7-6.1个孢子/mm2)在各处理间不存在显著差异。蚜群中产休眠孢子的蚜尸比例(P)与接种剂量C之间的关系同样拟合逻辑斯蒂方程(0.73≤r2≤0.85),仅10℃处理例外。在温度10-25℃和8-16 h日光照范围内,P-C关系可拟合复合逻辑斯蒂方程P=0.578/{1+exp[1.710-(0.136-0.0053T)C]}(r2=0.79)和P=0.534/{1+exp[1.639+(0.034-0.0053HL)C]}(r2=0.79),显示形成休眠孢子的蚜尸比例依赖于侵染性分生孢子的密度,且这一关系受环境温度和光周期调节,在给定分生孢子密度下,适温区内温度越低和日光照越长,越易形成休眠孢子。多变量线性相关分析表明,努利虫疠霉在寄主体内的休眠孢子形成,主要受接种体密度(剂量)的影响,环境因素中温度的影响大于光周期,后者的影响表现在同温度的互作效应。努利虫疠霉黍米凝胶颗粒培养物的产孢、贮存和毒力努利虫疠霉是严格的蚜虫专化病原真菌,体外培养的营养条件苛刻,其分生孢子弹射需要饱和空气湿度。用不同比例的黍米粉(80-95%)与3种高分子吸水凝胶粉(聚丙烯酰胺、聚丙烯酸和丙烯酰胺-丙烯酸共聚物)按5-20%的比例混合而成12种配方,分别压制成长2-5 mm、直径0.8mm的颗粒(3-4 mg/cm)作为努利虫疠霉的固体培养基质。在优化的培养条件下,每种颗粒接种新鲜液培菌丝(30 mg/g),再加无菌水使颗粒的含水量维持在87.5%左右,充分混匀后在20℃下静置培养4-12天。努利虫疠霉在所有配方颗粒上均生长良好,尤以含10%共聚物的颗粒最佳,经8天培养后可在100%RH下连续产孢6天,产孢总量高达58.5×104个孢子/mg,6天内的产孢分布依次为31.1%、30.6%、15.8%、10.3%、7.9%和4.3%,而同样条件下蚜尸的产孢量仅为4.2×104个孢子／头。这一优化配方的培养物颗粒在86-97%的非饱和空气湿度中也能弹射分生孢子并形成典型的孢子晕。在6℃下黑暗贮存,含水量>85%的颗粒培养物的贮存时间(120天)是室温下的2倍,比相同温度但含水量降低条件下贮存的培养物延长产孢能力40天,但产孢潜能的半衰期相近(34-39天)。冷贮70天的颗粒培养物弹射的分生孢子,其侵染力不及新鲜的培养物,接种后第4-6天对桃蚜若蚜的LC5o高于新鲜培养物颗粒(3.6、2.6和2.3个孢子/mm2)。这种新型的黍米凝胶颗粒不仅适宜努利虫疠霉的固体培养,而且可降低其产孢的湿度要求,是虫霉制剂技术的显著进步。努利虫疠霉的田间流行潜力有关努利虫疠霉流行规律的认识远不如广为人知的新蚜虫疠霉(P. neoaphidis)。将努利虫疠霉的液培菌丝嵌入含黍米粉的海藻酸盐均匀珠状颗粒之中,20℃下单粒产孢量高达28.4×104个孢子,是不含黍米粉的相同颗粒产孢量的9.5倍。在4-28℃下,黍米海藻酸盐颗粒的单粒产孢量是单头蚜尸的3.6-13.6倍,产孢持续时间是蚜尸的1.8-2.7倍,不管干燥与否均可在6℃下贮存120天。将此颗粒剂作为接种体释放到田间网笼(4m2／笼)内的先前均匀转接桃蚜的甘蓝植株(等距60 cm)上,诱发定殖桃蚜种群的流行病。在从秋至春历时4个月的田间试验中,按每株5-20粒释放黍米海藻酸盐颗粒剂后连续观察18周,努利虫疠霉在蚜群中成功定殖并诱发蚜虫死亡,但其流行始终维持在低水平(1%左右)徘徊。入春随温度上升和阴雨日增多,蚜虫发病死亡率略有提高,4号笼最高达到13%,5号笼8.6%,3号笼3%和2号笼1.3%,而作为对照的1号笼内无努利虫疠霉发生。镜检抽样植株上所有的病死蚜尸,发现试验期间产休眠孢子的蚜尸比例在多数抽样日超过30%,最高达95%。显然,努利虫疠霉在蚜群中的成功定殖和低水平流行,高比例蚜尸产生休眠孢子造成侵染循环中断是主要原因,显示该菌在蚜虫生物防治中的应用潜力是相当有限的。