流式细胞术检测乳腺癌患者循环肿瘤细胞的表达及其与中医辨证分型的关系

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目的1.探讨应用Moflo XDP超高速流式细胞仪检测外周血单个核细胞EpCAM、CK18和CD45的表达在判断乳腺癌患者外周血微转移的意义。2.分析乳腺癌患者循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells, CTCs)的表达与临床病理指标、乳腺癌分子分型、中医证型的关系。方法应用Moflo XDP超高速流式细胞仪对于62例女性乳腺癌及20例女性健康志愿者外周血EpCAM、CK18和CD45的表达情况进行研究,EpCAM、CK18同时(+)且CD45(-)定为阳性,以循环肿瘤细胞(CTCs)数目≥5个/7.5mL外周血定义为微转移阳性。对62例乳腺癌患者进行中医辨证分型并分析证型与循环肿瘤细胞的相关性,利用脏腑及八纲辨证分析化疗前后正邪的虚实变化。结果1. Moflo XDP细胞仪检测乳腺癌患者外周血CTCs的敏感性为10-“。2.20例健康志愿者CTCs均为阴性,62例乳腺癌患者化疗前CTCs的阳性率53.2%,二者差异有统计学意义(P<0.001);6例行新辅助化疗的Ⅲ期患者、27例姑息性化疗的Ⅳ期患者,对它们化疗前及第二周期化疗2周后进行CTC的检测,结果发现化疗前与化疗后的CTC阳性率分别为72.7%(24/33)、30.3%(10/33),化疗前与化疗后的CTCs的阳性率比较的差异有统计学意义(P<0.05)。3.62例乳腺癌患者CTCs的阳性率在不同TNM分期、Ki67、HER-2表达方面的差异有统计学意义(P<0.05),而在绝经状态、ER、PR表达方面的差异无统计学意义(P>0.05)。CTCs的阳性率随TNM分期级别阳性率逐渐增加。4. CTCs的阳性率在不同乳腺癌分子亚型之间的差异有统计学意义(P<0.05), HER-2扩增型、三阴性患者CTCs的阳性率明显高于LuminalA型及LuminalB型患者。5.将62例乳腺癌患者进行中医辨证分型,不同辨证分型患者CTCs阳性率由高到低依次为:热毒郁结证、冲任失调证、气血两虚证、肝郁证。热毒郁结证患者的CTCs阳性率与肝郁证、冲任失调证、气血两虚证患者比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。将肝郁证、冲任失调证、气血两虚证患者CTCs阳性率两两比较,差异无统计学意义(P>0.05);6例行新辅助化疗的Ⅲ期患者、27例姑息性化疗的Ⅳ期患者,化疗前实证患者占72.7%(24/33),虚证占27.3%(9/33),化疗后实证患者占42.4%(14/33),虚证患者占57.6%(19/33),化疗前后虚实变化的差异有统计学意义(P<0.05)。6.62例乳腺癌患者中,Luminal型(LuminalA型和LuminalB型)的热毒郁结证患者占38.7%(12/31),非Luminal型(HER-2扩增型和三阴性)的热毒郁结证患者占61.3%(19/31),两者差异存在统计学意义(P<0.001)。结论1.超高速流式细胞仪检测乳腺癌外周血循环肿瘤细胞敏感性、特异性均高。2.乳腺癌患者外周血中循环肿瘤细胞的阳性率与临床TNM分期、HER-2及Ki-67的表达相关,与月经状态、ER、PR的表达无关,化疗会影响CTCs的表达。乳腺癌分子亚型可以评估外周血微转移的风险,HER-2扩增型、三阴性的患者CTCs阳性率高。3.化疗前后中医辨证分型由实转虚逐渐演变,反映机体邪正盛衰与虚实变化的病理特点。4.乳腺癌CTCs日性的患者多见于热毒郁结证。非Luminal型(HER-2扩增型和三阴性)的患者中热毒郁结证多见。
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