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论文研究了一种新的基于iniferter活性自由基聚合制备分子印迹色谱固定相及在色谱分析中的应用方法。这种表面印迹的方法克服了传统的溶液聚合中模板分子包埋过深难以洗脱、研磨后聚合物颗粒形状不规则、色谱性能差等缺点,并且表面印迹聚合物的吸附位点一般都在固体载体的表面,因此降低了分子识别过程中的传质阻力,有效地改善了峰形。在制备过程中,首先通过一系列的化学反应,在硅胶表面引入二乙基二硫代氨基甲酰氧基(DC)基团,作为光引发转移终止剂,然后采用分子印迹技术,以甲基丙烯酸为功能单体和乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,在硅胶表面合成了对于磺胺二甲嘧啶(SMZ)具有选择性结合能力的新型高效液相色谱固定相,利用高效液相色谱、红外、元素分析、扫描电镜、氧瓶燃烧-离子色谱的方法对合成填料的物理特征及分离特性进行了表征。并研究了不同的合成条件(如光照时间、紫外灯光强、不同的单体比例等)对于色谱分离能力的影响。色谱实验表明该填料具有很高的选择性,在速为0.5ml/min的流动相条件下,实现了印迹分子与其类似物的基线分离(R=1.61)。
研究工作中,以合成的填料作为固定相,研究了牛奶中SMZ的测定方法,试验了不同的流动相、色谱柱温等对分离效果的影响。在优化的色谱条件下,对牛奶样品中的磺胺二甲嘧啶进行了测定。在0.1-50μg/mL浓度范围内,线性相关系数R>0.999,对浓度为0.025,0.25和0.5μg/mL的加标牛奶样品的回收率达78%以上,该方法的检出限为0.0025μg/mL,定量限为0.0079μg/mL。实验证明,表面分子印迹接枝硅胶可以用作高选择性的色谱固定相实现牛奶中痕量的磺胺二甲嘧啶的定量检测,可以简化复杂生物样品前处理步骤,缩短分析时间,防止由于残留的脂溶性组分的析出而堵塞色谱柱。与常规的固相萃取前处理柱相比,表面分子印迹材料制备简单、选择性较高,在生物样品中痕量物质分离富集方面具有广阔的应用前景。
结合iniferter的特点,在分子印迹硅胶上成功引入甲基丙烯酸缩水甘油酯,制备了外层具有亲水性,内层具有选择性识别作用的分子印迹-限进介质色谱固定相,并考察了其限进性能。结果显示,分子印迹-限进介质对于蛋白有一定的排阻功能。