川乌、草乌炮制工艺及指纹图谱的研究

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川乌、草乌是我国广泛使用的毒性药材,两者药效相似,中医认为其具有祛风除湿、温经止痛的功效。现代药理研究表明,川乌、草乌均具有抗炎、镇痛、心血管系统、免疫系统、抗癌、降血糖等作用。该类中药毒性剧烈,一般都要经过炮制后才能入药,目前川乌、草乌炮制工艺繁多,造成了市场上制川乌、制草乌的质量参差不齐,影响了临床用药的安全性与有效性。本实验对川乌、草乌进行了以下方面的研究:1川乌、草乌及其炮制品指标性成分的含量测定实验建立了川乌、草乌及其炮制品中指标性成分含量测定方法,采用HPLC法同时测定不同产地川乌、草乌及其炮制品中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、次乌头碱和乌头碱的含量,采用紫外分光光度法测定川乌、草乌及其炮制品中总生物碱和酯型生物碱的含量。结果表明,不同产地川乌、草乌及其炮制品中6种生物碱含量、总生物碱、酯型生物碱的含量差异较大,应建立一套科学合理的质量控制方法来保证其质量。2川乌、草乌炮制工艺的研究实验采用HPLC色谱法测定川乌、草乌不同炮制品中6种生物碱的含量,采用紫外分光光度法测定其总生物碱的含量,并以其含量为指标,对川乌、草乌的软化方式、高压蒸制工艺、高温烘制工艺、微波炮制工艺进行了考察,与2010年版《中国药典》一部收录的炮制方法进行比较,综合评价其炮制工艺。实验结果提示,最佳高压蒸制工艺为:川乌、草乌经润湿法处理后,于1.5 kg·cm-2压力下炮制150min,即得;最佳高温烘制工艺为:川乌、草乌经润透法处理后,分别于110℃恒温烘制8h和10h,即得;最佳的微波炮制工艺为:川乌、草乌经润透法处理后,分别于60%的微波火力下炮制18-20 min和25 min;与药典收录的炮制法比较,以上3种炮制工艺均具有一定的优点及可行性,可作为川乌、草乌的炮制新工艺。3乌头属中药炮制原理的研究实验以新乌头碱、乌头碱、次乌头碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱等6种生物碱对照品,进行恒温水解试验,并采用HPLC法测定其水解产物的含量,探索其水解规律,同时采用HPLC法测定川乌、草乌炮制前后主要成分含量的变化,探索其炮制原理。结果表明,双酯型生物碱在一定条件转化为单酯型生物碱,其过程中会产生一种中间产物,可能为焦乌头碱类生物碱。实验发现,乌头属生物碱的水解过程并不是简单的水解过程,其水解规律还有待进一步研究。4川乌、草乌及其炮制品指纹图谱的建立实验采用HPLC色谱法建立不同产地川乌、草乌指纹图谱,建立了川乌、草乌炮制品指纹图谱,并对其主要色谱峰进归属性鉴别,根据保留时间划分无酯型、单酯型、双酯型3个区域,为川乌、草乌及其炮制品的品种的鉴定及质量控制提供一定依据,为其质量标准提供一定的方法学依据。本实验建立了川乌、草乌及其炮制品的主要指标性成分含量测定方法,根据川乌、草乌文献研究的报道,结合工业饮片生产的需要,对川乌、草乌的炮制工艺进行了系统的考察,优选出更科学合理的炮制工艺。同时制定出川乌、草乌及其炮制品的HPLC指纹图谱,为川乌、草乌及其炮制品的品种的鉴定及质量控制提供一定依据。
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