激光联合马铃薯提取物外涂对黄褐斑动物模型黑素细胞病理形态的影响

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目的:通过激光联合马铃薯提取物外涂,治疗豚鼠黄褐斑动物实验模型,检测模型组皮损区黑色素细胞及黑色素颗粒变化的情况,探讨激光联合马铃薯提取物外涂对黄褐斑的治疗意义。  方法:将55只豚鼠分为正常对照组及模型组。正常对照组10只,模型组45只,其中单独激光治疗组15只,单独马铃薯提取物外涂组15只,二者联合治疗组15只。剪除其背部毛发面积约5x4cm2。其中模型组的豚鼠给予每日肌肉内注射黄体酮5ml/kg,同时给予320nm波长的中波紫外线照射豚鼠背部的裸露皮肤,一天1次,1次30分钟,一共照射50天,制作豚鼠黄褐斑的动物模型。50天建模完成后,分别取正常组及模型组豚鼠背部的裸露皮肤约0.3*0.3cm2,进行组织病理学的检查及SOD(superoxide dismutase,超氧化物歧化酶)和MDA(malondialdehyde,丙二醛)的检测,进一步验证豚鼠黄褐斑模型的成功建立。将造模成功后的豚鼠分成三个治疗组,分别为;A组:单独使用激光治疗组;B组:单独使用马铃薯提取物外涂组;C组:激光及马铃薯提取物外涂联合治疗组。治疗结束后,分别取正常豚鼠背部皮肤、造模后背部皮肤、治疗后即刻、治疗后一周、治疗后三周的豚鼠背部皮肤,分别行HE染色、MelanA免疫组化染色观察黑素颗粒数量的变化情况。采用图像分析法分析治疗前后表皮黑色素颗粒数量的改变。将最终的观察数据资料输入计算机SPSS17软件进行统计分析,结果以P≤0.05为有统计学意义,说明实验结果的有效性。  结果:1、经过50天造模后,根据所拍的照片观察到,实验组进行造模区域的皮肤颜色逐渐加深,期间肉眼可以观察到有明显的色斑形成的过程,并且可以观察到在造模的过程中伴随着皮肤发红、干燥脱屑等反应,50天造模后,豚鼠皮肤组织中SOD明显降低,MDA明显升高,说明黄褐斑模型造模成功。MelanA免疫组化染色后显示,造模后豚鼠皮肤黑素细胞与造模前的空白对照组相比显著增多。2、造模成功的豚鼠背部皮损经过治疗后黑素细胞数量均随时间推移而有所下降,差异具有统计学意义(P≤0.05);三个实验组的每一组豚鼠治疗后即刻,部分可见豚鼠黑素细胞稍有减少,但部分豚鼠黑素减少并不是很明显。在治疗结束后一周观察到豚鼠黑素细胞减少较明显,在治疗结束后三周可见黑素细胞均较治疗前显著减少,同时肉眼观察豚鼠皮肤较前颜色变淡。且马铃薯提取物外涂及Q开关1064nm(Nd:YAG)激光联合治疗组变化情况均显著优于马铃薯提取物外涂组与Q开关1064nm(Nd:YAG)激光组单独应用。实验后随访3个月,所有豚鼠均无不良反应发生。  结论:1、UVB(Ultraviolet Radiation B,中波紫外线)照射同时进行黄体酮肌肉注射可以建立豚鼠的黄褐斑模型。2、联合应用Q开关1064nm(Nd:YAG)激光及马铃薯提取物外涂治疗黄褐斑疗效显著优于其单独应用,且安全无副作用,治疗效果满意。
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