VEGF及其受体在寻常型银屑病中的表达及与中医证型的相关性研究

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目的:①通过检测寻常型银屑病患者皮损中血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体VEGFR-1(Flt-1)、VEGFR-2(KDR)的阳性表达,分析它们在寻常型银屑病患者皮损中及正常人皮肤中表达的差异和与银屑病的相关性;并用CD34标记血管内皮细胞,计数微血管密度(MVD)以了解血管生成与银屑病之间的关系。②通过检测不同中医辨证分型的寻常型银屑病患者血清中的VEGF水平,来探讨VEGF通路与银屑病不同中医证型的关联性。研究对象和方法:①病理标本:寻常型银屑病皮损标本来源于2014年1月~2015年1月陕西省中医医院皮肤科门诊患者,共计20例,并排除其他系统性疾病。所有患者均经临床和组织病理学检查确诊为寻常型银屑病,并处于进行期。正常皮肤组织则来自庙后街社区医院门诊手术室包皮环切术后的包皮组织,共计10例。采用免疫组化SABC法,检测寻常型银屑病皮损与正常皮肤组织中VEGF、Flt-1、KDR及CD34的表达和定位,并利用半定量计分法及Weidner法,分析其在皮损组和正常对照组中表达水平的差异及意义。②血清标本:寻常型银屑病血清标本来自陕西省中医医院皮肤科住院患者,共计50例,其中血热证20例,血燥证10例,血瘀证20例。患者无其他系统性疾病。10例正常对照组血清取自正常人,无明显系统疾病及其他皮肤病。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中VEGF的表达水平,根据结果分析正常对照组与银屑病组之间的差异,并对中医辨证分型三组的实验结果进行比较分析。③实验结果分析:免疫组化实验结果采用SPSS19.0统计软件中的独立样本t检验、Mann-whitney U检验及Pearson等级相关分析。ELISA实验结果采用SPSS19.0统计软件中单因素方差分析法。以P<0.05,P<0.01作为显著性界限。结果:①寻常型银屑病患者皮损中VEGF的阳性表达水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。②KDR和FLT-1在寻常型银屑病中的阳性表达均高于正常对照组,并有显著性差异(P<0.05)。其中,KDR在皮损组中的强阳性表达率为55%,FLT-1在皮损组中的强阳性表达率为45%。③在正常皮肤组织和银屑病皮损中均可见CD34的阳性表达,其中,正常对照组MVD值为(7.52±1.54),皮损组MVD值为(13.86±4.29),二者相比较,MVD值具有统计学差异(P<0.05)。④VEGF、FLT-1、KDR及MVD在寻常型银屑病患者皮损中的表达,两两比较,均具有显著正相关性,并有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。⑤中医辨证分型的三组患者血清中VEGF的水平均高于正常对照组,P<0.05,具有统计学意义。将中医辨证分型三组患者血清中VEGF水平相互比较,其中,血热证组>血燥证组>血瘀证组,且血热证组与血瘀证组、血燥证组比较有统计学意义(P<0.05),血瘀证组与血燥证组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:在银屑病的发病机制中,微血管生成异常与寻常型银屑病的发生、发展及复发存在密切关系。因此,新生血管形成的研究有助于揭示银屑病的发病机制,指导临床治疗。综合我们的研究结果表明,检测寻常型银屑病皮损中VEGF及其受体FLT-1、KDR和CD34的表达可以明确微血管形成在银屑病发病中的重要性,并对确定新的治疗靶点提供了理论依据。同时,通过检测寻常型银屑病不同中医证型组患者血清中VEGF的水平,探讨了银屑病中医辨证分型与VEGF表达水平之间的关联性,为中医辨证分型的现代化研究提供了重要的理论依据。
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