胍基丁胺对谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡的影响

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目的:研究一定浓度谷氨酸对PC12细胞的损伤作用,同时观察胍基丁胺对谷氨酸作用的影响,并初步探讨胍基丁胺的作用机制。方法:采用MTT法观察谷氨酸和胍基丁胺对PC12细胞活性的影响,荧光显微镜吖啶橙染色法观察细胞凋亡的形态特征,琼脂糖凝胶电泳观察细胞有无DNA断裂,结合流式细胞仪定量检测凋亡峰(AP)。结果:(1)MTT实验发现:谷氨酸浓度在2.5-20mmol/L范围内能明显抑制细胞活性,并呈浓度和时间依赖性(2)琼脂糖凝胶电泳检测到DNA断裂条带。(3)以5mmol/L谷氨酸作用24h为损伤模型,用吖啶橙染色荧光显微镜观察可见PC12细胞发生凋亡样改变。(4)在损伤模型组中加入不同浓度的胍基丁胺,MTT实验发现胍基丁胺浓度在0.1mmol/L~5mmol/L范围内能明显提高细胞活性。其中1mmol/L胍基丁胺+5mmol/L谷氨酸实验组在琼脂糖凝胶电泳分析中没有见到DNA梯形条带:流式细胞仪检测特凋亡峰,可见胍基丁胺能明显下降损伤模型组的细胞凋亡率,并随胍基丁胺的浓度加大,凋亡率随之下降。 结论:较高浓度的谷氨酸有兴奋毒性作用,细胞死亡机制主要为诱导细胞凋亡。胍基丁胺能明显拮抗谷氨酸所致的PC12细胞凋亡,其肌基丁胺对谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡的影响中文摘要机制可能和其非竞争性阻断谷氨酸的NMDA受体,减少钙离子内流,以及改善线粒体功能和减轻谷氨酸的氧化毒性有关。
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