不同转移潜能食管癌裸鼠模型的建立及差异蛋白的鉴定

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目的:建立具有不同转移潜能的高侵袭能力食管癌细胞株亚系裸鼠成瘤模型,通过分析其细胞生物学特性,比较两种移植瘤的成瘤情况,将为今后探索食管癌转移机制提供模型。  方法:利用Transwell侵袭小室从食管癌Eca-109细胞株中筛选出高侵袭能力食管癌细胞株亚系,HE染色比较细胞形态;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力的变化;用180标记定量蛋白质学鉴定食管癌Eca-109母系及亚希细胞株的差异蛋白,再通过裸鼠体内成瘤模型,观察成瘤率、成瘤时间、肿瘤生长情况及对裸鼠机体情况的影响,然后对肿块均行免疫组化染色检测RKIP的表达。  结果:利用Transwell侵袭小室从食管癌 Eca-109细胞株中筛选出高侵袭能力食管癌细胞株亚系,命名为Eca-109T4,2个细胞系细胞形态没有明显差异。MTT法检测显示,亚系Eca-109T4增殖能力强。并检测出7个差异蛋白质,注射Eca-109原代和Eca-109T4细胞的2组裸鼠成瘤率均为100%,Eca-109T4组成瘤时间早且瘤体成长快。免疫组化结果显示,RKIP蛋白表达在肿瘤中较正常食管组织明显下调。2组肿瘤细胞表达RKIP差异有显著性意义(P<0.05)。  结论:在遗传背景相似的前提下,建立的不同转移潜能的高侵袭能力食管癌细胞株亚系成瘤模型,为研究人食管癌转移机制提供了有力工具。
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