目前,高效酶固定化技术的发展仍然是一个挑战。为了牢固地固定酶并保持其天然构象,我们在载体表面设计了类似“鸟笼”样的结构来包覆酶。首先制备出聚甲基丙烯酸甲酯磁性微球（PMMA）并在磁性微球上接枝聚乙烯亚胺（PEI）,然后将蛋白吸附到这些链中间,最后用戊二醛（GA）交联PEI链,从而将蛋白封装于该结构内,该过程所采用的固定化方法称之为交联封装法。本文围绕交联封装法主要研究了以下几个部分:第一,本文首先利用化学沉淀法制备出油酸包裹的Fe₃O₄磁性纳米粒子,再以甲基丙烯酸甲酯（MMA）为单体,采用悬浮聚合制备出了PMMA磁性微球。随后,对微球表面进行功能化修饰,经实验测定,酯解后微球表面的羧基含量为0.85 mmol/g,接枝聚乙烯亚胺（PEI 1800）后微球表面的氨基含量为0.275 mmol/g。第二,先是以PEI 1800-PMMA磁性微球为载体,牛血清白蛋白（BSA）为模型蛋白,利用交联封装法制备了固定化BSA,并对该方法固定化原理、封装过程及效果、蛋白结构变化等进行了研究。结果表明,交联封装法符合我们最初的设计预期,PEI与GA反应生成的席夫碱结构能够将BSA封装在载体微球表面。该方法不但可以加强BSA与载体的结合力,还可以较大程度保持BSA的天然结构。第三,进而以PEI 1800-PMMA磁性微球为载体,将交联封装法应用于假丝酵母脂肪酶（CRL）固定化。通过脱附实验证实,CRL脂肪酶与载体的结合力显著增强,提高了固定化CRL的稳定性;SDS-PAGE实验表明,席夫碱结构实现了对CRL的封装;红外光谱分析酶二级结构表明,交联封装固定化的脂肪酶较好的保持了其构象结构;酶活性分析显示,交联封装固定化的脂肪酶活性明显高于共价和交联固定化酶的活性,接近于吸附固定化酶的活性。实验还考察了各个参数对封装CRL的影响,结果显示,在35℃下,戊二醛浓度0.75‰,pH 7.0,交联时间1 h时,磁性微球对CRL脂肪酶的固载量及酶比活达到了最佳条件,分别为38.6 mg/g,2.10 U/mg。第四,实验考察了交联封装法固定化CRL脂肪酶的温度适用范围,pH适用范围,热稳定性和pH稳定性,并与吸附法固定化CRL进行了比较。结果表明,交联封装固定化CRL脂肪酶的温度和pH适用范围扩大,且其热稳定性及pH稳定性均显著提高。实验结果还显示,交联封装法固定化CRL的K_m值（5.68 mg/mL）比游离CRL（4.38 mg/mL）的高,而V_max值要比游离酶低。