转录因子Sox2维持小鼠切牙生长发育的功能研究

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研究目的:转录因子Sox2属于转录因子Sox家族成员之一,Sox2在胚胎干细胞的自我更新和全能性的维持中起着重要作用。前期研究己发现Sox2蛋白高度表达于小鼠切牙上皮结构,从小鼠牙齿起始发育E11.5天的牙板上皮到小鼠成年后切牙唇侧颈环上皮,都始终存在Sox2蛋白的高度特异性表达。但是小鼠切牙的发育过程是否受到转录因子Sox2的调控以及具体作用机制还有待进一步解释,因此本论文的研究目的:(1)构建Shh-cre,Sox2fl/fl条件敲除小鼠,观察小鼠切牙发育的表型;(2)探讨转录因子Sox2影响小鼠切牙发育的功能机制。研究方法:构建Shh-cre,Sox2fl/fl转基因小鼠,选择同窝出生的突变型及野生型小鼠用于本实验研究,取三次不同窝实验表型分析结果用于本实验结论。通过HE染色、免疫组化、体视显微镜观察条件敲除小鼠切牙发育的表型,探讨转录因子Sox2对小鼠切牙发育的影响机制。研究结果:(1)构建的Shh-cre,Sox2fl/fl转基因小鼠,在牙胚发育之前(E10.5天),将Sox2基因在牙上皮中敲除,发现小鼠在出生后即死亡,并且出现了腭裂、舌体与下颌粘连等表型。(2)通过对胚胎期小鼠切牙牙胚的形态学观察发现,构建的Shh-cre,Sox2fl/fl转基因小鼠切牙颈环发育异常,不能形成典型的切牙颈环结构;并且Shh-cre,Sox2fl/fl转基因小鼠切牙成釉细胞、成牙本质细胞形态发育出现异常,但对小鼠磨牙的表型发育的影响并不明显。在先前实验得到的K14-cre,Sox2fl/fl条件敲除小鼠出现的下颌第三磨牙牙胚缺失表型在Shh-cre,Sox2fl/fl条件敲除小鼠中并没有出现。结论:(1)转录因子Sox2同样参与维持小鼠腭部及舌的正常发育。(2)在构建的Shh-cre,Sox2fl/fl条件性敲除小鼠中,小鼠切牙牙胚发育受到影响,Sox2基因可作为小鼠切牙正常发育中一个必不可少的转录因子。
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