载尿激酶环状RGD修饰脂质体的体外溶栓实验研究

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目的:体外制备不同凝龄的富血小板血栓(platelet-rich thrombi,PRT)及富红细胞血栓(erythrocyte-rich thrombi,ERT),应用薄膜水化法制备载尿激酶(urokinase,UK)环状RGD修饰脂质体在体外行溶栓实验,评价载尿激酶环状RGD修饰脂质体的体外溶栓能力。方法:一、应用薄膜水化法制备载尿激酶环状RGD修饰脂质体(简称:载尿激酶c RGD脂质体),在同一条件下制备新鲜的富血小板血栓,以HE染色评价血栓性质。在37℃恒温的循环条件下行体外溶栓实验。实验分组:⑴载尿激酶c RGD脂质体组(UK-c RGD-liposomes组;包载UK浓度:3000U/ml);⑵单纯载尿激酶脂质体组(UK-liposomes组,包载UK浓度:3000U/ml);⑶等体积的空白c RGD脂质体组(PBS-c RGD-liposomes组);⑷单纯的PBS组。溶栓后计算各组血栓的溶栓率。二、分别制备凝龄为1小时、6小时、12小时组、24小时、48小时的富血小板血栓(PRT)及富红细胞血栓(ERT),以HE染色评价血栓性质。每组均予载尿激酶c RGD脂质体(3000U/ml)溶栓。37℃恒温条件下在EP管中行溶栓实验。溶栓后计算各组血栓的溶栓率。结果:1、在体外模拟循环条件下,载尿激酶cRGD脂质体组与单纯载尿激酶脂质体组分别与空白脂质体组比较,两者的溶栓率均显著高于空白脂质体组,差异均具有统计学意义(P0.05);其余凝龄组的ERT和PRT组间的溶栓率差异,都具有统计学意义(P<0.05),即6h、12h、24h、48h凝龄组ERT的溶栓率均比同凝龄组的PRT高。结论:本课题组制备的载尿激酶环状RGD修饰脂质体具有良好的溶栓作用,且溶栓效果强于未经环状RGD修饰的单纯载尿激酶脂质体。载尿激酶环状RGD修饰脂质体在体外溶解富血小板血栓和富红细胞血栓的效果随着血栓凝龄的增加而逐渐减小并且随着凝龄的增加,富血小板血栓较同样凝龄的富红细胞血栓更难溶解。
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