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【目的】化疗是临床上乳腺癌患者常用的治疗手段之一,但化疗药物是一把双刃剑,在利用细胞毒性杀死癌细胞的同时,它也会增加癌细胞对化疗药物的抗性并促进癌细胞的转移。本课题的主要目的是探讨阿霉素对乳腺癌细胞侵袭和转移能力的影响,旨在发现可能引起临床上经阿霉素治疗后促进乳腺癌细胞发生转移的关键基因和信号通路变化。【方法】1.利用CCK8细胞增殖检测、划痕愈合实验、Transwell侵袭实验来观察阿霉素对乳腺癌细胞增殖与迁移能力的影响;通过RT-PCR技术和蛋白质免疫印迹Western Blot对转移相关标记物分别从mRNA和蛋白水平进行验证。2.构建BALB/c裸鼠肺转移模型,通过活体成像技术、小鼠肺转移结节、HE染色对阿霉素敏感株MCF-7和耐药株MCF-7/ADR转移能力进行观察。3.对MCF-7和MCF-7/ADR进行高通量转录组测序,并对差异基因进行相关生物学信息分析,用于挖掘阿霉素促进乳腺癌细胞转移的关键基因和相关通路。观察去乙酰化酶SIRT7和酪氨酸激酶受体TIE2表达水平改变情况;在乳腺癌细胞中分别过表达SIRT7和敲低TIE2,通过Western Blot来检测SIRT7与TIE2之间调控关系。5.通过GEPIA和TIMER数据库分析SIRT7和TIE2在乳腺癌中相互作用关系;通过免疫组化检测乳腺癌患者组织中SIRT7和TIE2的表达差异情况。6.通过划痕愈合实验、Transwell侵袭实验来观察SIRT7与TIE2对乳腺癌细胞迁移能力的影响;通过Western Blot检测转移相关标记物随SIRT7和TIE2表达水平改变而改变的情况。7.通过构建BALB/c裸鼠肺转移模型,实验组分别给与SIRT7激活剂白藜芦醇和TIE2抑制剂卡博替尼,通过肺转移结节观察SIRT7的激活和TIE2的抑制对乳腺癌细胞转移能力的改变情况;进一步通过免疫组化来检测SIRT7和TIE2的表达水平。【结果】1.阿霉素能抑制乳腺癌细胞的增殖,但也能促进乳腺癌细胞伤口愈合和侵袭能力;阿霉素刺激能促进转移发生相关标记物的mRNA和蛋白水平上调。2.转录组测序结果提示MCF-7/ADR转移能力得到明显增强的原因可能与SIRT7的下调和TIE2的上调有关。3.Western Blot结果显示阿霉素能通过下调SIRT7进而负调控TIE2,且通过激活AKT通路来促进乳腺癌细胞的转移;通过GEPIA关系。4.经阿霉素治疗的乳腺癌病人癌组织中SIRT7表达水平下调,且与TIE2呈负相关关系。5.在乳腺癌细胞中分别过表达SIRT7和敲低TIE2后乳腺癌细胞转移与侵袭能力减弱,与促进转移相关蛋白标记物表达水平下调。6.在BALB/c裸鼠肺转移模型中,实验组小鼠转移能力相比较于对照组减弱,免疫组化结果显示白黎芦醇能下调乳腺癌细胞中SIRT7,卡博替尼能抑制乳腺癌细胞中TIE2。【结论】1.阿霉素能抑制乳腺癌细胞的增殖,但也可能使乳腺癌细胞转移能力得到增强;2.SIRT7是阿霉素诱导乳腺癌转移的一个关键分子;3.SIRT7通过负调控TIE2抑制乳腺癌转移的发生;4.阿霉素通过SIRT7/TIE2轴诱导乳腺癌的转移。