【摘 要】
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红曲作为传统食品在我国应用广泛,聚酮类化合物是红曲霉菌代谢过程中产生的重要次级代谢产物,随着现代生物技术的发展,聚酮化合物的代谢得到人们的广泛重视。本文以实验室保
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红曲作为传统食品在我国应用广泛,聚酮类化合物是红曲霉菌代谢过程中产生的重要次级代谢产物,随着现代生物技术的发展,聚酮化合物的代谢得到人们的广泛重视。本文以实验室保存的红曲霉菌Monascus15-1为研究对象,对Monascus15-1发酵过程中合成的聚酮类化合物进行了检测与分析,对红曲霉菌聚酮化合物合成相关基因进行了克隆,得出的主要结论如下:通过对Monascus15-1的形态学观察分析,根据饭冢广和林庆福的红曲菌分类检索表,推断Monascus15-1为M.araneosus蛛网状红曲菌。Monascus15-1能够代谢红曲色素、桔霉素等聚酮类化合物,并可以用Monascus15-1菌体提取基因组DNA和RNA来进行聚酮合酶相关基因的克隆研究。以-1提取的基因组DNA为模板,根据LC系列引物设计出的2条简并引物,克隆出一段388bp的基因BLAST分析后发现与土曲霉洛伐他汀相关基因部分序列具有76%的相似性,推测与红曲霉菌聚酮类化合物Monacolin K的合成有关基因相关。利用染色体步移技术,设计三对巢式引物对红曲霉菌qzc01基因的上下游序列进行扩增,可以分别扩增出700bp、300bp和900bp左右的基因片段。推测为红曲霉菌qzc01基因的上下游侧翼序列。
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