载紫杉醇PH敏感聚合物胶束对人肺癌A549细胞的作用及作用机制

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目的:探讨紫杉醇载药对人肺癌A549细胞的作用及其作用机制,为其临床应用提供一定的依据。  方法:本实验采用人肺癌A549细胞为实验对象,选择合适浓度的游离紫杉醇作为阳性对照药物,探究紫杉醇载药对肺癌A549细胞的增殖及其机制。MTT法研究紫杉醇载药所用的空白材料对人肺癌A549细胞是否有毒;以不同浓度的游离紫杉醇及其载药作用于人肺癌A549细胞,并设只有完全培养基的细胞为阴性对照,MTT法观察各个浓度药物对该种肿瘤细胞的抑制作用,并筛选合适浓度的游离紫杉醇作为阳性对照;Hoechst33342/PI双染法观察细胞凋亡与坏死情况;应用Western-blot技术检测Bcl-2和Bax的蛋白表达情况;应用RT-PCR技术检测Bcl-2和Bax的基因表达情况;应用试剂盒法检测细胞上清液中LDH的含量,检测细胞中SOD和MDA的含量。  结果:紫杉醇载药所用空白材料对细胞无毒;紫杉醇载药对细胞增殖有抑制作用,并呈浓度依赖性; Hoechst33342/PI双染结果显示,药物作用浓度越高,细胞坏死及凋亡程度越大;Westen-blot结果显示,Bax的蛋白表达量与浓度成正比例关系,Bcl-2的蛋白表达量与浓度呈反比例关系;RT-PCR结果显示,Bax的基因表达量与浓度成正比例关系,Bcl-2的基因表达量与浓度呈反比例关系;试剂盒法结果显示,药物浓度越大,上清液中LDH含量越高,细胞中MDA含量越高,细胞中SOD含量越低。  结论:紫杉醇载药对人肺癌A549细胞有抑制作用,并且可将细胞停滞在G2/M期。
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