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目的通过对急性发作期哮喘患儿和毛细支气管炎患儿血清25-羟维生素D3水平的测定,探讨血清25-羟维生素D3水平与儿童哮喘急性发作和毛细支气管炎的关系,为小儿喘息性疾病的治疗提供新的理论和临床依据。对象和方法一、研究对象1.哮喘组:2009年12月~2010年3月在中国医科大学附属盛京医院小儿呼吸内科病房住院患儿18例,符合中华儿科学会呼吸学组儿童支气管哮喘防治常规提出的儿童哮喘诊断标准,年龄10个月~5岁,平均3.12岁,其中男12例,女6例。2.毛细支气管炎组:同期在我院小儿呼吸内科住院患儿24例,年龄2月~3岁,平均9.98月,符合第六版《儿科学》毛细支气管炎临床诊断标准,其中男17例,女7例,母亲无吸烟史,足月儿,除外呼吸道异物、呼吸道发育异常以及支气管淋巴结结核等所致的喘息,并除外过敏性疾病病史和相关家族史。3.对照组:来自于同期本院小儿骨外科住院儿童20例,既往无支气管哮喘、过敏性疾病病史和相关家族史,近4周无感染史,无活动性佝偻病史,年龄8.5月~5岁,平均2.44岁,其中男10例,女10例。二、主要仪器与试剂1.仪器:离心机、-70℃冰箱、全自动洗板机、全自动酶标仪、酶联免疫试剂盒2.试剂:25-羟维生素D3酶联免疫试剂盒(购自大连宝晶生物技术有限公司)三、方法(一)病史采集患儿入院时详细询问个人过敏史,家族过敏史,既往喘息史,有无感冒喘息史。(二)标本采集患儿入院时进行治疗前抽取空腹静脉血1ml,离心1000r/min×3分钟,收集血清后置—70℃冰箱冻,健康对照组采集标本与其相同。(三)操作步骤1.取出酶标板,依照次序对应分别加入100ul的标准品于空白微孔中2.分别标记样品编号,加入100ul样品于空白微孔中3.在标准品孔和样品孔中加入50ul的酶标记溶液4.36±2℃孵育反应60分钟5.洗板机清洗5次,每次静置10-20秒6.每孔加入底物A、B液各50ul7.36±2℃下避光孵育反应15分钟8.每孔加入50ul终止液,终止反应。(四)结果判断(1)仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔德OD值(2)B=标准品OD值,BO=标准品0点的OD值(3)B/BO%值为纵坐标,以标准品的浓度为横坐标,在对数坐标纸上绘制标准曲线(4)在标准曲线上查找对应的浓度范围。四、统计学分析采用SPSS软件进行统计学分析,结果用均值±标准差表示,应用t检验,P<0.05有统计学意义。结果一、哮喘急性发作期患儿血清25-羟维生素D3水平与对照组的比较哮喘患儿急性发作期血清25-羟维生素D3水平明显低于对照组,两者比较有显著性差异,t值为2.924,P<0.006。二、毛细支气管炎患儿血清25-羟维生素D3水平与对照组的比较毛细支气管炎患儿血清25-羟维生素D3水平明显低于对照组,两者比较有显著性差异,t值为2.694,P<0.01三、哮喘及毛细支气管炎患儿血清25-羟维生素D3降低者所占比率25-羟维生素D3血清正常值为11ng/ml-60ng/ml。哮喘组18例,25-羟维生素D3降低6例,占33.34%;毛细支气管炎组24例,25-羟维生素D3降低8例,占33.34%。四、哮喘急性发作期与毛细支气管炎患儿血清25-羟维生素D3水平的比较哮喘急性发作期与毛细支气管炎患儿血清25-羟维生素D3水平相比没有差异,t值为-0.297,P>0.5,两者比较没有显著性差异。结论1、哮喘患儿急性发作期血清25-OH-D3水平均明显低于对照组儿童。2、毛细支气管炎患儿血清25-OH-D3水平均明显低于对照组儿童。3、33.34%的哮喘患儿急性发作期血清25-OH-D3水平下降,33.34%的毛细支气管炎患儿同样存在血清25—OH-D3水平的下降。4、哮喘儿童急性发作期和毛细支气管炎患儿两组血清25-OH-D3水平没有显著性差异。