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目的了解连云港地区多药耐药肺炎克雷伯菌的耐药情况和所携带的β-内酰酶基因、膜孔蛋白基因和可移动遗传元件的存在状况，对抗菌药物耐药机制和耐药相关基因进行研究。对了解本地区肺炎克雷伯菌的耐药流行状况、指导临床合理使用抗菌药物、研发新药的导向等具有重要意义。方法收集蚌埠医学院附属连云港医院2008年11月至2009年10月，送检标本中分离的多药耐药肺炎克雷伯菌20株，采用微量肉汤法和药敏纸片法对21种临床常用抗生素进行药敏试验，按CLSI推荐的初筛试验和纸片确证试验测定ESBLs。采用PCR法检测31种常见的耐药基因，包括β-内酰胺酶基因21种（A类TEM、SHV、CTX-M-1群、CTX-M-2群、CTX-M-8群、CTX-M-9群、CTX-M-25群、PER、GES、VEB、CARB、LAP、KPC,B类IMP、VIM、NDM,C类LEN、OKP、DHA群,D类OXA-10群、OXA-48群）；膜孔蛋白基因ompK36；9种可移动遗传元件遗传标记（接合性质粒traA、trbC,转座酶tnpU、tnp513,插入序列IS26、ISEcp1,整合子int Ⅰ1、intⅠ2、intⅠ3)。经琼脂糖凝胶电泳，检出的阳性基因测序和比对。结果本实验20株多药耐药肺炎克雷伯菌对青霉素类、头孢菌素类、氨曲南和复方新诺明耐药率为100%，氨基糖苷类、喹诺酮类耐药率为80%-95%；20株多药耐药肺炎克雷伯菌有19株产超广谱β-内酰胺酶，占实验菌株的95%；β-内酰胺酶基因检出A类TEM80%、CTX-M-1群25%、LAP20%和C类DHA40%；ompK36膜孔蛋白基因检测出4株为缺失和16株为突变；可移动遗传元件检出traA10.0%、trbC60.0%、tnpU20.0%、tnp51360.0%、IS26100.0%、ISEcp160.0%、intⅠ195.0%。结论连云港地区肺炎克雷伯菌耐药最严重的抗生素为氨苄西林，其主要产超广谱β-内酰胺酶，但对碳青霉烯类均敏感；本地区多药耐药肺炎克雷伯菌携带的β-内酰胺酶耐药基因以产TEM型和DHA型为主；ompK36膜孔蛋白基因检测结果显示该蛋白均有缺陷；可移动遗传元件遗传标记的携带率较高，尤其是IS26和intⅠ1。提示本地区肺炎克雷伯菌多重耐药的表型可能与β-内酰胺酶基因、ompK36膜孔蛋白缺陷和多种可移动遗传元件相关。