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本文系统研究了盐酸克伦特罗(Clenbuterol,CL)在猪尿液、血液和组织中的残留分布及代谢规律。并通过放射性同位素~3H标记试验,研究了CL在小白鼠体内的残留分布及代谢规律,进一步验证CL在猪体内残留分布及代谢规律。初步建立了猪眼睛中CL的高效液相色谱(HPLC)检测方法。 本实验选用24头健康育肥猪(平均70kg左右,公母各半),随机分成两组,分别饲喂CL日粮(5mg/kg和10mg/kg),连续30天。在用药的第1、2、3、4、6、8、10、14、20和29天,每剂量组任选3头,采集尿样和血液样品;10mg/kg剂量组于用药的第2、4、6、10、14天分早(8:00～9:00)、中(12:00～1:00)、晚(5:00～6:00)三点,每点随机采集6份尿样;在停药的第0、3、7、14天每剂量组任选3头猪屠宰,采集尿液、血液、眼睛、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏和肌肉(三角肌、第1～3腰椎肌、股二头肌)样品。采用高效液相色谱法测定样品中的药物残留。检测结果显示:①CL口服吸收很快,饲喂第1天即可从尿液中检出,用药期有两个残留高峰分别是饲喂第3天和第20天,残留浓度随用药剂量增加升高;同一天不同时间点尿液中CL残留不同,中午、傍晚尿液中CL残留浓度显著高于早上尿液中的残留浓度,中午和傍晚尿液中残留差异不显著,但中午有高于傍晚的趋势。②猪饲喂CL后第1天即可从血液中检出CL,给药期血液中CL残留浓度总体呈上升趋势,尿液中残留浓度随用药剂量增加而升高。③停药0天,CL在尿液、血液、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏和肌肉(三部分)中残留分别为338.6ng/g、54ng/g、243 ng/g、514.7ng/g、116.8ng/g、66.5ng/g、13.8ng/g、11.5ng/g、12.1ng/g(5mg/kg剂量组),1417ng/g、104ng/g、352ng/g、825.7ng/g、183.8ng/g、135.2ng/g、19.4ng/g、18.7ng/g、18.1ng/g(10mg/kg剂量组)。④不同组织中CL代谢速度不同,除肌肉停药第7天不可检出外(低于检测限0.5ng/g),其它组织停药14天仍可检出,残留浓度分别为15.1ng/g、1.2ng/g、16.1ng/g、17.1ng/g、4ng/g、4.6ng/g(5mg/kg剂量组),21.8ng/g、5.5ng/g、41.2ng/g、39.6ng/g、9.6ng/g、8.3ng/g(10mg/kg剂量组)。研究表明:CL易在猪体内残留,分布广泛且代谢较为缓慢,不同组织代谢速率不同。 另外,本文还对~3H标记的CL在小白鼠体内的残留分布及代谢规律进行了研究,试验结果表明:CL在小白鼠体内分布广泛,在所取的13种样品中,均有CL总残留,不同的组织残留浓度不同,代谢速度也不相同。与对猪进行的实验相比,基本一致。在小鼠实验中CL在毛发残留较高,代谢最慢,而且药物在毛发中存在稳定,所以是检测CL非常理想的靶器官(组织)。小白鼠是色素缺乏性动物,但在眼睛中CL残留仍然较高,代谢较慢,仅次于毛发,所以眼睛也是检测CL较为理想的靶器官(组织)。 最后,初步建立了猪眼睛中CL高效液相色谱(HPLC)检测方法,制作了标准曲线,线性范围为0.01μg/ml-10μg/ml,方法的检测限为2.5ng/g,定量限为5ng/g,回收率为70%～110%,变异系数3.95%～8.42%,用该方法检测猪眼睛中CL残留结果如下:①停药0天,猪眼睛中CL残留浓度远远高于其它组织,两剂量组CL残留浓度分别高达1716.1ng/g和2981.5ng/g。②CL在猪眼睛中代谢较为缓慢,停药第14天两剂量组残留浓度仍高达107.2ng/g和385.2ng/g。由此可知,CL在眼睛中具有高残留、慢消除的特点,进而表明眼睛是