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目的:探讨钙离子载体诱导慢性髓细胞性白血病细胞分化生成树突状细胞的作用,探索一种更快速、简便、高效的获取大量树突状细胞的方法。 方法:用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离初治慢性髓细胞白血病患者骨髓单个核细胞,给予钙离子载体(100,200,300,500ng/ml)培养9天或细胞因子组合:粒-巨噬细胞集落刺激因子GM-CSF(1×10~3U/ml)、白细胞介素IL-4(1×10~3U/ml)及肿瘤坏死因子TNF-α(200U/ml)联合培养9天,倒置显微镜和扫描电镜下观察细胞形态,分别于培养第0,1,3,5,7,9天取样计细胞数,台盼兰拒染法计算细胞存活率,流式细胞术检测CML-DCs的免疫表型(CD83,CD80,CD86),MTT法检测CML-DCs刺激自体或异体T淋巴细胞增殖能力,Transwell培养板上测定CML-DCs的迁移能力。 结果:钙离子载体(CI)或细胞因子联合(CK)均能诱导初治慢性髓细胞性白血病骨髓单个核细胞表现出典型的树突状细胞(DC)形态,倒置显微镜下可见大部分细胞体积增大,边缘不光整,伸出数量长短不一的毛刺状突出,可见明显的多形性。诱导24h CI组即出现形态学的变化,72h后多数细胞呈典型的DC形态;而CK组在诱导5天时部分细胞才开始出现毛刺状突起,在培养9天时呈典型的DC形态。扫描电镜下CI或CK组合诱导的CML-DCs胞体圆形或不规则梭形,表面呈微绒毛状或裙褶状,部分细胞胞膜伸出典型树枝状突起。随培养时间延长,各组细胞计数和存活率均下降。CI浓度为200ng/ml、培养72h时的细胞数为(0.73±0.06)×10~6,细胞存活率为(68.4±4.60)%,均高于CK组培养9天时细胞数(0.53±0.10)×10~6和细胞存活率(51.0±5.08)%,两者均有统计学差异(P<0.05)。CI或CK均能诱导CML细胞表达较高水平的免疫表型,CI(200ng/ml)诱导的CML-DCs中CD83的表达率为(55.31±10.86)%,高于细胞因子组合诱导的表达率(29.90±6.22)%,两者有显著性差异(P<0.01),而