维生素D对不同剂量X线照射小鼠免疫功能的影响

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背景:放射治疗(Radiation Therapy,RT)是治疗恶性肿瘤的重要手段之一。已经证实,放射治疗在杀灭肿瘤细胞的同时,对机体正常组织尤其免疫系统产生一定的损伤和抑制作用,目前对于放射治疗引起的免疫损伤,临床上尚无可靠有效的防治措施。近年来的研究发现,维生素D除了具有维持骨骼发育及钙磷调节作用以外,还具有多种功能,其中包括免疫功能调节[1]、肿瘤抑制功能[2]等。但维生素D能否改善肿瘤放射治疗导致的免疫功能低下尚不清楚。本研究采用腹腔注射维生素D的方式,观察其对不同剂量X线照射小鼠免疫功能的影响,以期为肿瘤放疗患者的免疫功能的改善提供理论依据。研究方法:为探明维生素D对不同剂量X线照射小鼠免疫功能的影响,本研究:1.以6-8周龄健康ICR系小鼠作为研究对象,将小鼠随机分为5组:对照组2Gy和5Gy照射组,建立2Gy和5Gy X线照射小鼠免疫抑制模型;另外,对两组不同剂量X线照射的小鼠分别给予维生素D补充,即为2Gy VD给药组和5Gy VD给药组;使用ELEKTA AXESSE医用电子直线加速器常规普放技术进行照射,照射剂量分别为2Gy、5Gy,剂量率为600c Gy/min。2.维生素D给药组小鼠在2Gy和5Gy X线照射后,每只小鼠连续7 d腹腔注射维生素D 6 IU,其他组小鼠则给予注射等量无菌注射用水,于实验的第8天,5组小鼠均处死;3.分别测定小鼠质量、胸腺质量、脾脏质量,并计算胸腺指数、脾脏指数;4.HE染色观察胸腺组织形态;5.MTT法检测脾脏T淋巴细胞增殖能力;6.酶联免疫法检测脾细胞IL-2的分泌量;7.血细胞计数仪检测小鼠外周血白细胞、红细胞、血小板、淋巴细胞数量;结果:1.与对照组相比,2Gy、5Gy组胸腺质量、脾脏质量显著降低;2Gy VD给药组较2Gy模型组相比,胸腺质量、脾脏质量显著增加,5Gy VD给药组组较5Gy模型组相比,脾脏质量显著增加,胸腺质量有增加趋势,但不显著。2.与对照组小鼠相比,2Gy、5Gy组小鼠胸腺指数、脾脏指数均显著降低;与2Gy组相比,5Gy组小鼠的脾脏指数显著降低,胸腺指数有降低趋势,但不显著;2Gy VD组较2Gy组相比,小鼠胸腺指数、脾脏指数均显著增高;5Gy VD组较5Gy组相比,小鼠胸腺指数显著增高,但脾脏指数变化不显著。3.与对照组小鼠相比,辐射小鼠胸腺组织皮质淋巴细胞减少,胸腺萎缩,且5Gy组小鼠胸腺组织破坏更严重;维生素D给药组辐射组相比,胸腺皮质淋巴细胞增多,形态恢复明显。4.与对照组小鼠相比,2Gy、5Gy组小鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力显著降低;与2Gy组相比,5Gy组小鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力进一步降低;2Gy VD组较2Gy组相比,小鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力显著增高;5Gy VD组较5Gy组相比,小鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力变化不显著。5.与对照组小鼠相比,2Gy、5Gy组小鼠脾细胞IL-2的分泌量显著降低;与2Gy组相比,5Gy组脾细胞IL-2的分泌量有降低趋势,但不显著;2Gy VD组较2Gy组相比,小鼠脾细胞IL-2的分泌量有增高趋势,但不显著;5Gy VD组较5Gy组相比,小鼠脾细胞IL-2的分泌量显著增高。6.与对照组相比,2Gy组小鼠外周血除红细胞外,白细胞、血小板、淋巴细胞数量显著下降,5Gy组指标均显著下降;与模型组相比,维生素D给药组白细胞、血小板、淋巴细胞数量有升高趋势,但不显著。结论:1.X线照射剂量越大,免疫系统受到的损伤越大。2.2Gy X线照射下,6 IU维生素D能够显著改善受照射小鼠的免疫功能,5Gy X线照射下,该剂量的维生素D对小鼠免疫功能改善作用减弱。
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