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目的观察炙甘草汤对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)致心律失常的影响,通过对自噬基因、蛋白和自噬在MIRI时磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/磷酸化蛋白激酶(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路中发生机制的研究,探讨炙甘草汤对MIRI损伤致心律失常的作用机制。方法采用随机数字表法将72只健康雄性SD大鼠分为6组,每组12只。即炙甘草汤高剂量组、炙甘草汤中剂量组、炙甘草汤低剂量组、稳心颗粒组、模型组、假手术组。炙甘草汤低、中、高剂量组给药剂量分别为11.43、22.86、45.72g/kg,稳心颗粒组给药剂量为2.43g/kg。假手术组和模型组给予等量的蒸馏水,各组按体积10ml/kg灌胃给药,每日2次,连续10天。末次给药2小时后,紧急制备MIRI模型。除假手术组仅穿线、不结扎外,其他各组大鼠通过手术结扎冠状动脉左前降支30分钟,然后松线再灌注60分钟的方法制备心肌缺血再灌注模型,造模成功后采集各组大鼠的血液及心脏组织。主要观测指标:1.记录心电图,计算每组大鼠缺血后30min和再灌注60min内室速的持续时间及发生率、室颤的持续时间及发生率。2.利用TTC-Evans法检测大鼠心肌梗死面积。3.用全自动生化仪检测血清中肌酸肌酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)及谷草转氨酶(AST)的含量和总抗氧化能力(T-AOC)水平。4.采用Elisa法检测心肌肌钙蛋白(CtnI)的含量。5.采用免疫组化法检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达。6.运用Western-blot检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC-3)、自噬标志物Beclin1和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达及磷酸化p-PI3K、p-Akt、p-mTOR的水平。结果1.模型组室速发生率为100%,室颤的发生为91.67%;通过炙甘草汤预处理后,各给药组的持续时间明显缩短(P<0.01),其中高剂量组的室速、室颤发生率明显下降(P<0.01),持续时间最短(P<0.01)。2.TTC-Evans法检测结果显示:与假手术组相比,模型组的大鼠心肌梗死面积明显增大(P<0.05);与模型组相比,炙甘草汤各剂量组及稳心颗粒组能使大鼠的心肌梗死面积明显缩小(P<0.05),其中炙甘草汤中剂量组效果更明显;2.与假手术组相比,CK、LDH、AST的模型组水平明显升高(P<0.01);与模型组相比,炙甘草汤高、中、低剂量组的CK、LDH、AST水平明显降低;与假手术组相比,模型组T-AOC的水平明显降低(P<0.05),与模型组相比,炙甘草汤各剂量组的T-AOC水平明显升高。3.Elisa法显示:与假手术组相比,模型组中CtnI的含量明显升高(P<0.01),炙甘草汤高、中、低剂量组的含量明显低于模型组(P均<0.01)。5.免疫组化结果显示:与假手术组相比,模型组中的PI3K、AKT、mTOR的表达明显升高(P均<0.01);与模型组相比较,炙甘草汤给药组中的PI3K、AKT、mTOR的表达随剂量的的增加而明显降低(P均<0.01)。6.Western-blot的结果显示:(1)自噬相关蛋白LC-3、Beclin1的表达:与假手术组相比,模型组中的表达量明显升高(P均<0.01);炙甘草汤各剂量组的表达随着剂量的增加有不同程度的下降(P均<0.01)。(2)信号通路PI3K/Akt/mTOR相关蛋白的表达:与假手术组相比,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR在模型组中的比值明显降低(P均<0.01);与模型组相比,炙甘草汤各给药组中的比值明显升高。结论1.炙甘草汤预处理能明显减少MIRI致心律失常的发生。2.炙甘草汤预处理能使MIRI大鼠的心肌梗死面积明显缩小,心肌酶降低,表明炙甘草汤具有抗MIRI致心律失常的作用。炙甘草汤能提高心肌细胞的抗氧化能力,抑制细胞的过度自噬,上调PI3K的表达,进一步上调Akt和mTOR的表达,可能是通过PI3K/Akt/mTOR信号通路起到抗MIRI致心律失常的作用。