目的:为了完善广地龙质量控制体系,本研究对其质量标准进行系统研究。在《中国药典》2015年版已收载广地龙性状、鉴别、检查等检测项的基础上补充广地龙的DNA条形码基源鉴别方法;建立广地龙的含量测定方法与指纹图谱检测、分析方法;确定广地龙标准汤剂的制备工艺,研究广地龙标准汤剂质量标准,为广地龙相关质量标准研究提供参考。方法:1.采用DNA条形码技术对收集到的广地龙样品进行基源鉴定,结合2015年版《中国药典》中广地龙性状、显微鉴别、薄层鉴别、检查、浸出物测定,确保用于课题研究、实际生产的广地龙样品均为正品。2.采用高效液相色谱(HPLC)法,建立广地龙中次黄嘌呤、肌苷的含量测定方法,建立广地龙HPLC指纹图谱共有模式。3.以出膏率、次黄嘌呤和肌苷含量总量的转移率为评价指标,进行单因素考察,包括加水倍数、浸泡时间、煎煮时间、煎煮次数等因素,将最佳因素水平范围筛选出来;然后进行正交试验,详细考察具体参数,通过正交试验数据分析,优选出广地龙标准汤剂最佳制备工艺参数,并进行工艺验证。4.收集13批次广地龙样品,以确定的制备工艺制备广地龙标准汤剂,测定pH值、总固体、指标成分含量,计算指标成分的转移率;同时对广地龙标准汤剂的指纹图谱进行研究。结果:1.DNA条形码技术可以对收集到的广地龙样品进行基源鉴定,结果准确。2.确定供试品溶液制备方法,优化色谱条件,含量测定方法学考察结果显示,次黄嘌呤、肌苷检测进样浓度线性范围分别为1.58μg/mL~31.6μg/mL(r=0.999 9)、5.52μg/mL~110.4μg/mL(r=0.999 8),线性关系良好;验证指标精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2.0%(n=6);次黄嘌呤、肌苷的准确度分别为103.0%(RSD=1.7%,n=6)、101.2%(RSD=1.2%,n=6)。成功建立了30批广地龙样品的HPLC指纹图谱,通过与对照品图谱比对,匹配出12个共有峰,指认了6个色谱峰,其中有28批样品的HPLC指纹图谱与HPLC对照指纹图谱相似度>0.900。3.广地龙标准汤剂的制备工艺:称取广地龙饮片100.0 g,加8倍量水浸泡30 min,回流20 min,趁热过滤,药渣再加6倍量水,回流20 min,趁热过滤,药渣再加6倍量水,回流20 min,趁热过滤,合并3次滤液,减压浓缩至500 mL,即得广地龙标准汤剂。4.制备了13批广地龙标准汤剂,其中次黄嘌呤和肌苷总量的转移率范围为78.7~101.8%,pH值范围为5.6~6.0,总固体范围为0.22~0.48 g,建立了13批广地龙标准汤剂的指纹图谱,各批次广地龙标准汤剂的HPLC指纹图谱与HPLC对照指纹图谱相似度>0.900。结论:DNA条形码技术准确、可靠,可以用于广地龙药材的基源鉴定;建立了30批广地龙药材HPLC指纹图谱及次黄嘌呤、肌苷含量测定方法,该方法准确、简便、具有良好的重复性,可为广地龙药材的质量控制提供系统评价;优选的广地龙标准汤剂制备工艺稳定可靠、重复性好;对13批广地龙标准汤剂质量标准进行了系统研究。争取为中药标准化的建设以及广地龙各种用药形式的研究提供数据支持以及参考,有益于实现统一的管理和监督。