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背景:胆囊是胆道系统的重要组成部分。胆囊通过吸收、分泌和运动而发挥浓缩、储存和排出的生理功能。胆囊还是胆道动力的启动器官。目前大量研究证实胆囊炎、胆石症、胰腺炎等疾病的发生与胆道动力的障碍密切相关。慢性结石性胆囊炎(Chronic Calculous Cholecystitis,CCA)是临床上多见的胆道系统疾病,是物理、化学、神经、体液等多种因素作用的结果,其中胆道动力的减弱在其发病机制中起着重要作用,但是尚未有研究完全阐明胆道动力学改变的机制。目前对胃肠动力机制已有了较深入的研究,Cajal间质细胞(Interstitial cells of Cajal,ICC)是一类特殊的间质细胞,已经证实其在哺乳动物的消化道广泛存在,它是胃肠道的起搏细胞,而且其还具有神经传递功能。在许多消化道动力性疾病中都有Cajal间质细胞的直接或间接参与,例如糖尿病胃轻瘫、先天性巨结肠等病。ICC在胃肠道平滑肌与周围平滑肌细胞间存在广泛的间隙连接,并构成网络结构在胃肠道动力机制中发挥关键作用。间隙连接主要由间隙连接蛋白43(Connexin 43,Cx43)和间隙连接蛋白45(Connexin45,Cx45),研究证明Cx43在胃肠道动力障碍疾病中有着重要作用。Cx45在血管平滑肌及心肌相关性疾病中亦扮演着重要角色。胆道与胃肠道壁有着相似的结构,在人慢性结石性胆囊炎动力机制改变的过程中,Cajal间质细胞的分布已有研究报道,但是在临床上慢性结石性胆囊炎发生时,尚未有学者研究Cajal间质细胞与间隙连接蛋白Cx43及Cx45的表达与疾病发生的关系。目的:分析人慢性结石性胆囊炎胆道动力减弱时,ICC、Cx43和Cx45的分布与表达与胆道动力的关系。方法:1.收集我院手术切除的非瘤非炎性胆囊息肉胆囊和慢性结石性胆囊炎胆囊标本分别作为实验组和对照组,制作石蜡切片,HE染色,观察标本炎症程度来判断标本是否可入组。采用免疫组织化学技术检测各组胆囊Cx43和Cx45的表达,其阳性表达应为棕黄色颗粒,观察并做统计学分析处理。2.采用western blot技术对各组胆囊C-kit、Cx43、Cx45水平进行检测,并做统计学分析处理。3.采用RT-PCR技术检测各组胆囊C-kit、Cx43、Cx45 m RNA的表达,并做统计学分析。4.对各组胆囊行免疫荧光双染,分别标记C-kit和Cx43、C-kit和Cx45,并采用激光共聚焦显微镜观察和检测间隙连接蛋白Cx43与Cx45的分布与表达。结果:1.与对照组胆囊相比较,慢性结石性胆囊炎胆囊内棕黄色颗粒的分布明显稀疏,且数目减少。2.Western blot结果显示,慢性结石性胆囊炎组胆囊C-kit、Cx43和Cx45蛋白表达水平显著下降(P<0.01)。3.分析RT-PCR结果,显示慢性结石性胆囊炎组胆囊C-kit、Cx43和Cx43的m RNA表达水平显著下降(P<0.05)4.激光共聚焦显微镜检测显示:对照组Cajal间质细胞形态清晰,呈散在分布,细胞两端发出突起,C-kit表达较强;Cx43阳性表达与C-kit阳性表达有大面积的重合区域,Cx45阳性表达较弱,与C-kit阳性表达重合较多。慢性结石性胆囊炎组Cajal间质细胞形态模糊,数量明显减少,C-kit、Cx43、Cx45阳性表达明显减少(p<0.05).结论:慢性结石性胆囊炎中,C-kit、Cx43和Cx45的蛋白表达的减弱和分布的减少,提示慢性结石性胆囊炎时胆囊ICC遭到破坏、分布减少,ICC与胆囊平滑肌细胞间、ICC与ICC间及平滑肌细胞之间的间隙连接减少,这可能是导致其胆囊收缩力下降的一个重要因素。