论文部分内容阅读
目的:紫杉醇作为临床一线抗肿瘤药物,对各种恶性肿瘤均有显著疗效,但其在使用过程中表现出一种呈剂量依赖的神经毒性,即紫杉醇诱发的外周神经病理性疼痛,降低患者生活质量,尚无有效治疗手段,制约着紫杉醇在肿瘤病人治疗中的应用。阐明其发病机制有十分重要的临床意义和价值。本实验通过腹腔注射紫杉醇制备大鼠紫杉醇诱发神经痛模型,鞘内注射γ-氨基丁酸B（GABAB）受体激动剂巴氯芬、拮抗剂Saclofen及核因子κB（nuclear factor kappa B,NF-κB）抑制剂SN50,观察GABAB受体在紫杉醇诱发神经痛大鼠背根神经节（dorsal root ganglia,DRG）/脊髓背角NF-κB通路的调控作用。方法:自河北医科大学动物实验中心购买清洁级健康雄性SD大鼠（160180 g）,腹腔注射紫杉醇制备大鼠紫杉醇诱发神经痛模型,取模型制备成功的40只,采用随机数字表法,根据鞘内给药不同分为4组（n=10）:紫杉醇组（P组）:生理盐水10μl;巴氯芬（Baclofen）组（B组）:Baclofen 0.5μg/10μl;Saclofen组（S组）:Saclofen 30μg/10μl;SN50组（SN组）:SN50 200 ng/10μl。另取10只同周龄大鼠腹腔注射等体积溶剂并鞘内注射生理盐水10μl作为对照组（C组）。5组大鼠分别于腹腔给药前1 d（T1）、鞘内给药前1 d（T2）、鞘内给药后2 h（T3）测定大鼠50%机械缩足阈值（PWT）,T3时点完成PWT测定后快速取出DRG和脊髓背角,采用分子生物学方法测定GABAB1受体、NF-κBp65及炎性因子白介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNFα）的表达变化。结果:1与T1时点比较,除C组外其余各组T2时点的PWT均降低（P<0.05）;与T2比较,T3时点B组和SN组PWT升高,而S组PWT降低（P<0.05）。2 PT-PCR结果:与C组比较,P组脊髓背角GABAB1受体mRNA表达下调,而DRG中GABAB1受体mRNA表达上调（P<0.05）;与C组比较,P组脊髓背角和DRG中NF-κBp65、IL-1β和TNFαmRNA均表达上调（P<0.05）。与P组比较,B组脊髓背角和DRG中GABAB1受体mRNA均表达上调,而NF-κBp65、IL-1β及TNFαmRNA表达下调（P<0.05）;S组和B组GABAB1受体及上述因子表达则正好相反,SN组脊髓背角和DRG中,随着NF-κBp65、IL-1β及TNFαmRNA表达下调,GABAB1受体mRNA表达也下调（P<0.05）。3 Western-blot结果:与C组比较,P组脊髓背角GABAB1受体蛋白表达下调,而DRG中GABAB1受体蛋白表达上调（P<0.05）;与C组比较,P组脊髓背角和DRG中NF-κBp65、IL-1β和TNFα蛋白均表达上调（P<0.05）。与P组比较,B组脊髓背角和DRG中GABAB1受体蛋白均表达上调,而NF-κBp65、IL-1β及TNFα蛋白表达下调（P<0.05）;S组和B组GABAB1受体及上述因子表达则正好相反,SN组脊髓背角和DRG中,随着NF-κBp65、IL-1β及TNFα蛋白表达下调,GABAB1受体蛋白表达也下调（P<0.05）。结论:紫杉醇诱发神经痛大鼠DRG和脊髓背角中GABAB受体通过调控NF-κB通路的表达变化,在神经痛的发生发展中发挥作用。