miR-181c在乳腺癌中的生物学功能及靶基因探究

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目的探索microRNA-181c-5p(miR-181c)在乳腺癌中的水平和潜在功能。方法miR-181c在乳腺癌细胞系和乳腺癌组织中的表达水平用实时荧光定量PCR技术测定。而MTT实验,平板克隆形成实验,划痕实验,transwell小室实验,western blot实验和流式细胞分析实验则都用来测试miR-181c在两种不同的乳腺癌细胞系中的功能。双荧光素酶报告基因实验用来确定miR-181c和靶基因丝裂原激活蛋白激酶激酶激酶激酶 4(mitogen-activated protein kinase kinase kinase kinase 4,MAP4K4)之间直接结合的关系。内源性MAP4K4在乳腺癌中的表达水平和所扮演的角色也利用以上实验技术来探究。结果miR-181在乳腺癌细胞系和乳腺癌组织中都是低表达的。上调miR-181c的水平能够抑制细胞增殖、细胞迁移、细胞侵袭,并且能够影响细胞周期、将细胞阻滞在G0/G1期。miR-181能够负调节MAP4K4的mRNA和蛋白水平,MAP4K4是 miR-181 的直接靶基因。用 siRNA-MAP4K4(siR-MAP4K4)敲减 MAP4K4 也可以抑制细胞增殖、细胞迁移、细胞侵袭、将细胞阻滞在G0/G1期。结论miR-181c在乳腺癌中扮演着抑癌角色,并通过靶向调控MAP4K4在抑制肿瘤发生中发挥重要作用。
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