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目的:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,也是导致女性死亡的重要肿瘤疾病之一。乳腺癌是一种有多种基因共同参与,多条因素共同影响,不断累积形成的疾病,有明显的家族遗传性。因其没蛋白的保护,处于高氧自由基环境中,而且它缺少有效修复系统,极易发生突变。近年研究发现线粒体基因的结构变异在肿瘤形成过程中经常发生。微卫星不稳定性(microsatelliteinstability,MSI)是指肿瘤组织和相应的正常组织对比,等位基因的拷贝数发生改变,也就是微卫星重复串联序列次数发生改变。近年来,研究人员在许多肿瘤中发现了线粒体DNA微卫星不稳定性的现象,如在食管癌、肾癌等肿瘤中均发现的8272位点9bp缺失现象。本研究通过对家族性乳腺癌患者、一级健康女性亲属、散发性乳腺癌患者及正常人群的外周血中线粒体基因中易发生MSI的8272区域进行测序及分析,探索线粒体基因微卫星不稳定性与乳腺癌发病风险及发病年龄关系。为更好了解乳腺癌的发生、发展及家族性乳腺癌的基因诊疗提供新思路。方法:1实验对象均为女性,无既往其他恶性肿瘤病史。研究对象分为四组:(1)散发性乳腺癌患者52例,(2)家族性乳腺癌患者50例,(3)一级女性亲属46例,(4)正常女性作为对照组,为44例。乳腺癌患者均选自就诊于河北医科大学第四医院乳腺中心并经过病理学确的患者;一级女性亲属选自家族性乳腺癌家系,无乳腺相关疾病;对照组选自河北医科大学第四医院体检中心正常体检、年龄相当的健康女性,获得研究对象知情同意之后,采取其外周静脉血5ml,并记录各组临床病理资料。2实验过程用纯化试剂盒提DNA,定量检测DNA产物是否合格,以5’-ACCACTTTCACCGCTACACG-3’,5’-TTTAGTTGGGGCATTTCAC TG-3’为上下游引物,进行PCR扩增包括8272位点的线粒体DNA片段,后将PCR产物以电泳证实后送测序公司测序。3统计分析采用SPSS19.0统计软件进行统计,以χ2检验(Pearson Chi-Square test)对散发乳腺癌患者及家族性乳腺癌患者临床类型的差异以及各实验组mt MSI分布频率进行两两比较,单因素分析采用Kaplan-Meier方法及Log-Rank方法,以上P<0.05有统计学意义,0.05<P<0.1定义为边界差异,可能具有统计学意义。结果:1对8154-8380线粒体基因片段测序分析发现共有13个MSI位点,变异率约为5.7%,其中发生MSI的样本例数超过样本总量的5%为高频位点。在192个实验样本中19例发生了8272位点9-bp缺失,约占样本总量的9.9%,属于高频位点。2以χ2检验(Pearson Chi-Square test)对四个实验组中8272位点9-bp缺失分布频率两两比较,P值均大于0.05,提示8272 9-bp的缺失与乳腺癌的发病风险无关。3单因素分析采用Kaplan-Meier绘制发病年龄曲线。用Log-Rank方法分析8272位点MSI与家族性乳腺癌及散发性乳腺癌发病年龄关系:8272位点9-bp缺失与家族性乳腺癌的发病年龄无关(P=0.876),8272位点9-bp缺失与散发性乳腺癌的发病年龄(P=0.090)为边界线差异,提示可能与乳腺癌的发病年龄有关。结论:1 8154-8380线粒体基因片段中8272位点为发生MSI的高频位点2 8272 9-bp缺失变异情况与散发乳腺癌及家族性乳腺癌的发病风险无关。3 8272 9-bp缺失变异情况与家族性乳腺癌的发病年龄无关,与散发性乳腺癌的发病年龄可能有关,待进一步研究。