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毛桃是我国长江流域桃产区的最主要砧木,但其抗病虫及抗逆能力相对较弱,且嫁接品种个体间生长不整齐,故在生产上有一定的局限性。‘GF43’李是欧美桃生产大国广泛使用的优良的桃砧木,具有良好的耐涝性,能适应长江流域生长季高温多湿的条件。然而‘GF43’李存在座果率低,扦插生根难,需要通过组织培养快速获得大量遗传稳定、生长一致的苗木用于生产。‘GF43’李存在不抗寒缺陷,需要通过育种进一步改良。由于果树遗传背景复杂,采用常规方法改良砧木品种难度较大。随着现代生物技术的发展,植物转基因技术得到广泛应用。基因转化可以有目的地改善不利性状,是砧木品种改良的有效新途径。本试验建立了欧洲李(Prunus domestica)的实生后代‘GF43’李快繁体系、高效再生体系和遗传转化体系,并用农杆菌介导法将细菌乙酰胆碱氧化酶codA基因转入‘GF43’李中,以期获得携带具有普遍抗性的‘GF43’李新种质。研究结果如下:1.‘GF43’李的高效快繁体系研究发现:消毒方法以75%的酒精浸润20s,0.1%HgCl2+0.01%吐温对外植体表面消毒6min为最佳;MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0mg/L的启动培养基最利于腋芽萌发;LP+6-BA 0.5mg/L+IBA 0.1mg/L的继代增殖培养基上试管芽增殖倍数最高(5.6倍/30d),且植株生长健壮;筛选出的适宜生根培养基为LP+IAA0.5mg/L+0.1%活性炭,适宜的移栽基质为珍珠岩:蛭石:草炭土为1:1:1的配比。2.通过对基本培养基的类型、生长调节剂种类和浓度、暗培养时间、叶片放置方式等因素对‘GF43’李叶片再生频率影响的研究,发现TDZ比6-BA能更有效的诱导叶片不定芽的再生;生长素IBA、叶片近轴面接触培养基的接种方式和培养基中添加蔗糖是诱导不定芽再生的关键因子;14d的叶片作外植体,以及培养初期进行2d的暗培养可以大幅度提高再生频率。通过再生体系优化,发现14d叶片,近轴面接种在LP+TDZ 3.0mg/L+IBA 1.0mg/L+蔗糖30g/L培养基上,暗培养2天,再转为光照培养30d时,再生率可以达到85.2%,不定芽平均再生数量为6.4个/叶块。3.对‘GF43’李叶片侵染时间、共培养时间、抑菌素种类和浓度、不同选择压等遗传转化影响因素的研究。获得的‘GF43’李遗传转化体系为,在农杆菌浓度OD600=0.5时,叶片经农杆菌浸染5 min,在LP+TDZ 3.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L+30g/L蔗糖培养基上共培养3d(暗培养2d)后,添加Cb150mg/L,能获得最佳的GUS瞬时表达率为33.5%,最佳选择压为Km 15mg/L。农杆菌介导法获得的‘GF43’李抗性芽进行GUS染色,鉴定出GUS染色阳性芽4个,这些试管苗株系中很可能已经转入codA基因,需进一步验证。