论文部分内容阅读
第一部分血管内皮生长因子对肺表面活性物质磷脂合成的影响[摘要]目的研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor VEGF)对肺表面活性物质合成、分泌的影响,探讨防治早产儿呼吸窘迫综合征(RDS)的新途径。方法孕19天Wistar大鼠剖腹取胎鼠,原代培养肺泡Ⅱ型细胞,分成VEGF组、地塞米松组、VEGF加地塞米松组和对照组进行试验,测定肺表面活性物质总磷脂、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰甘油(PG)、鞘磷脂(SM)含量。结果VEGF组、地塞米松组与VEGF加地塞米松联合应用组总磷脂含量较对照组均显著增加,联合应用组总磷脂增加最明显。VEGF组、地塞米松组和联合应用组均能使PC、SM增高,VEGF对PC、SM作用更明显。VEGF和联合应用组尚可增加PG含量,而地塞米松对PG的合成无明显作用。结论VEGF比地塞米松能更有效地刺激早产鼠肺泡II型细胞合成和分泌肺表面活性物质磷脂,它与地塞米松具有协同作用,可使肺表面活性物质磷脂进一步增加。VEGF可能通过促进肺泡II型细胞的发育,增加肺表面活性物质磷脂的合成,从而改善早产儿肺功能,防止早产儿RDS的发生。第二部分血管内皮生长因子对肺泡Ⅱ型细胞相关受体的影响目的:研究血管内皮生长因子(VEGF)对肺泡表面活性物质结合蛋白B(SP-B surfactant protein B)、肺泡Ⅱ型细胞VEGF及其受体Flt-1、Flk-1表达的影响,探讨其联合使用地塞米松的作用。方法:孕19天Wistar大鼠剖腹取胎鼠,原代培养肺泡Ⅱ型细胞,分成VEGF组、地塞米松组、VEGF加地塞米松组和对照组进行试验,测定肺泡Ⅱ型细胞VEGF及其受体Flt-1、Flk-1和SP-B表达。结果:VEGF组、地塞米松组与VEGF加地塞米松组SP-B阳性表达,对照组阴性表达;VEGF组与VEGF加地塞米松组VEGF、Flt-1、Flk-1阳性表达,地塞米松组VEGF、Flt-1、Flk-1阴性表达。结论:VEGF能促进肺泡发育和肺表面活性物质结合蛋白B的合成、分泌,拮抗地塞米松下调肺泡Ⅱ型细胞受体的表达。但是否能减轻孕妇使用地塞米松引起的胎儿肺与体重的比值下降,次级肺泡隔形成减少等副作用,尚待进一步研究。第三部分:血管内皮生长因子与地塞米松对早产鼠肺发育影响的实验研究目的动物实验研究血管内皮生长因子(VEGF)以及地塞米松单独或联合应用对早产大鼠肺表面活性物质、肺泡表面活性物质结合蛋白B mRNA(SP-B mRNA)表达的影响,探讨血管内皮生长因子(VEGF)以及地塞米松单独或联合应用与肺发育的关系,为临床防治早产儿呼吸窘迫综合征(RDS)提供新途径。方法孕15d清洁级Wistar大鼠12只,随机分为4组,每组平均3只,试验分组:VEGF-165组、地塞米松组、VEGF加地塞米松组和对照组进行试验,应用薄层层析法测定肺组织中肺泡表面活性物质总磷脂、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰甘油(PG)、鞘磷脂(SM)含量。同时应用RT-PCR检测早产鼠肺组织中肺泡表面活性物质结合蛋白B(SP-B mRNA)的表达。结果VEGF-165组、地塞米松组与VEGF加地塞米松联合应用组肺组织中总磷脂含量增加,其中联合应用组总磷脂含量最高。VEGF组与对照组比较PC、PG含量有显著性差异, SM含量无显著性差异。地塞米松组与对照组比较PC、SM含量有显著性差异, PG含量无显著性差异。地塞米松组与VEGF加地塞米松组肺组织中SP-B mRNA表达与对照组比较,p<0.05 ,差异有显著性,VEGF组与对照组比较,p>0.05,差异无显著性。结论VEGF-165能促进肺表面活性物质的合成和分泌,VEGF、地塞米松对肺泡磷脂各成分及蛋白的影响各不相同,两者具有协同作用。它们可能通过不同的机制,增加了肺泡表面活性物质的合成和分泌,同时在分子水平上促进肺表面活性蛋白的分泌与合成,改善了肺功能,有利于防止因肺表面活性物质缺乏所致的早产儿RDS的发生。第四部分血管内皮生长因子与维生素A对胎兔动脉导管和肺发育的影响目的血管内皮生长因子(VEGF)与维生素A(VitA)对胎兔动脉导管和肺发育的影响,为防治早产儿动脉导管未闭寻找新的途径。方法8只孕兔随机分为4组,VEGF组、VitA组、生理盐水对照组,每组各2只:分别在受孕第25天给予VEGF0.1μg/㎏,第25和26两天连续运用3000IU/kgVitA,第25和26两天连续运用生理盐水1ml/㎏。于孕第27天内(早产期内)解剖孕兔,取胎兔的肺组织、动脉导管和及肝兔的羊水。羊水做羊水板层小体测定,肺组织固定后HE染色了解肺的发育情况,部分动脉导管固定后HE染色了解内膜增殖情况以及测定导管内钙浓度。结果VEGF组和对照组比较肺组织发育有显著性差异,而动脉导管内膜增殖程度与钙浓度无显著性差异。VitA组导管内膜增殖程度和导管内钙浓度比对照组明显增加。结论羊水内注射VEGF能促进肺发育,而对动脉导管无明显影响。VitA能增加导管内钙浓度,促进胎兔动脉导管的发育。