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目的 研究表明人类乃至整个动物界的生殖发育都正受到日益严重的环境雌激素的影响，但环境雌激素对生殖系统发育影响的机理却很不清楚。睾丸是雄性生殖系统的核心，睾丸的发育与睾丸自身下降关系密切，睾丸下降不全其功能必然受到影响。睾丸引带是影响睾丸下降的重要因素，而环境雌激素对睾丸引带的影响情况尚未见到深入的研究。本实验采用公认的环境雌激素己烯雌酚(DES)作用于怀孕母鼠，观察胎鼠睾丸引带的形态学及细胞超微结构的变化，并应用免疫组织化学方法检测胎鼠睾丸引带中肌动蛋白(ACTIN)及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达的情况，以探讨DES影响睾丸引带发育的情况及机理。 材料和方法 8～10周龄雌性昆明小鼠60只随机分成6组(每组10只)：正常组、对照组、实验组1、实验组2、实验组3及实验组4。实验组1、2、3、4分别给予DES 200μg／kg.d、DES 100μg／kg.d、DES50μg／kg.d、DES 25μg／kg.d，DES以DMSO为溶剂；对照组仅给予DMSO；正常组不给任何药物。雌雄小鼠按常规合笼交配，以出现阴栓作为受孕标志。发现阴栓当天定为妊娠第0天，记为GD0(gestationday,GD)。正常组不给任何药物，其它组在GD9～GD17上午8时皮下注射给药，其中对照组给予DMSO 0.2ml／d，实验组分别给予DES 200ug／kg．d、DES 100ug／kg．d、DES 50ug＆g。d、DES 25卜hg．d，每次 每只小鼠所用的 DES均溶于 0二ml DMSO中。GD17下午 6时脱颈椎 处死怀孕母鼠，观察其死胎情况，迅速取出活胎鼠，取其下腹部，分 别固定于10％福尔马林、2．5％戊二醛，24小时后取材。将雄性胎鼠 以4卜m厚作冠状位连续切片，HE染色，光镜观察睾丸引带组织学变 化：免疫组织化学方法检测睾丸引带中＊＊＊mI＊＊A的表达。＊＊＊D呵 及 PCNA免疫组织化学染色切片均选择 10张切片，前者经计算机图 像处理系统分析后，记录其阳性灰度值，后者则记录其PCNA标记 指数o＊＊AN人 扫描电镜、透射电镜分别观察翠丸引带形态学及 细胞超微结构的变化。死胎率之间用11检验，阳性灰度值及PCNA 标记指数均数采用 t检验。应用 SAS 6刀4统计软件进行统计分析。 结果1．DES可致部分母鼠产前数大开始出现阴道出血现象，该 母鼠有较高的死胎率，随DES剂量增大，死胎率增高。2光镜观察可 见正常组及对照组睾丸引带发育良好，引带球由两部分构成：中心为 间叶组织，外周为肌细胞，两者之间分界清楚；DE S处理组可见睾丸 引带发育不良，引带球体积相对较小，间叶组织与肌细胞之间无明显 分界，组织结构紊乱，DES剂量越大，结构紊乱现象越明显。3．DES 处理组小鼠翠丸引带中ACTIN含量降低，DES剂量越大，ACTIN含 量越低。4．较大剂量（女 DES 200p叭g．d及 DES 00p叭g．d组）DES 可致睾丸引带中PCNA含量降低。5．扫描电镜观察可见睾丸引带包括 引带索和引带球。正常组引带球发育良好，较为粗大，呈圆柱状。引 带索粗短。翠丸发育良好，较为饱满，位于膀肮颈偏上，与肾脏距离 二 较远。实验组引带球发育较差，体积较小，呈圆锥状。引带索扁平。 细长。睾丸发育较差，位于肾脏下极，与膀既距离较远，显示睾丸下 降受阻。6．透射电镜观察发现正常组睾丸引带细胞内存在较为粗大的 肌丝，排列整齐，可见明显的密体，胞浆中有丰富的细胞器。实验组 细胞内肌丝较细小，排列紊乱，密体不明显，胞浆中细胞器散在分布。 结论1．DES可致胎鼠睾丸引带形态异常、组织结构紊乱，且与 剂量关系密切。2．DES可降低睾丸引带中ACTfN含量，预示DES影 响睾丸引带的收缩活性，可能是影响睾丸下降的原因。3．DES可使睾 丸引带中PCNA含量降低，抑制细胞增殖，影响睾丸引带正常形态 结构和生理作用的产生。