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目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)局部注射联合中药外敷对新西兰大白兔糖尿病足溃疡的治疗效果及其可能机理。方法:取新西兰大白兔70只,体重2.0~3.0kg,雌雄不限,将新西兰兔高糖高脂饲料喂养2个月,于(第1天、第4天、第7天)禁食6h后采用耳缘静脉注射由无菌生理盐水配制的2.5%四氧嘧啶50mg/kg,共3次,每天监测血糖,第10天测空腹血糖>11.1mmol/L入选模型,取入选模型新西兰兔32只按不同的治疗方法将其随机分成4组,每组8只动物。随机分为:对照组(A组),BMSCs移植治疗组(B组),中药治疗组(C组),BMSCs移植联合中药治疗组(D组),每组各8只;将4组实验用兔大腿部切除直径15mm圆形区域全层皮肤,建立糖尿病足溃疡模型。新西兰大白兔糖尿病足溃疡造模后每天肉眼观察创面愈合情况,记录创面上皮完全覆盖所需时间。造模后第0,4,8,12,16和20天,各组兔糖尿病足溃疡创面用数码相机拍照,经图像分析计算未愈合面积,计算创面愈合率,比较各组溃疡愈合情况。对各组做相应处理15天后,沿超出创面外缘2毫米处取下创面组织利用HE染色、Masson染色光学显微镜下观察观察溃疡创面愈合组织的细胞数量、新生血管及胶原纤维等组织结构;电子显微镜下观察溃疡愈合组织中成纤维细胞结构和细胞周围胶原沉积情况;采用RT-PCR法检测糖尿病足溃疡创面处皮肤组织bFGFmRNA表达。结果:1.大体观察(创面愈合时间和愈合率):A组溃疡愈合缓慢,至20天时创面仍未完全上皮覆盖,溃疡愈合率31%;B组创面完全上皮覆盖所需时间平均天数为16天,溃疡愈合率57%;C组创面完全上皮覆盖所需时间平均天数为14天,溃疡愈合率62%;D组愈合迅速,创面完全上皮覆盖所需时间平均天数为11天,溃疡愈合率76%。2.光学显微镜观察:A组肉芽组织结构松散不清晰,成纤维细胞数量较少,轮廓不清,散在分布;细胞外基质较少,胶原纤维束稀疏、排列混乱,毛细血管较少。D组肉芽生长迅速,大量成纤维细胞聚集成群,轮廓较清晰;细胞外基质丰富,胶原纤维束排列密集而有序,可见大量血管生成,组织分层愈合良好。B组、C组光学显微镜下结构明显优于A组,但较D组差。3.电子显微镜观察:A组成纤维细胞形态不规则,细胞内容物少,周围胶原纤维稀疏,排列混乱。B组、D组成纤维细胞体积大,形态完好,胞质内的内质网、线粒体、溶酶体、高尔基复合体等细胞器丰富,周围可见大量胶原纤维,排列整齐、有序。C组细胞结构及胶原沉积情况介于两者之间。4.bFGFmRNA表达情况:D组明显高于A组(p <0.01),B、C组高于A组,差异较明显(p<0.05);B组与C组差异无统计学意义(p>0.05)。结论: BMSCs局部注射联合中药外敷可促进糖尿病足溃疡创面的愈合,显著上调局部组织bFGFmRNA的表达,其机制可能与中药促进创面愈合的同时为所移植BMSCs生存并发挥生理功能提供了有利的细胞外环境有关,同时本实验所用中药的某些成分可能诱导BMSCs向成纤维细胞分化。