背景神经系统疾病包括阿尔兹海默症、帕金森综合征等,神经系统疾病的发病率逐年增高,目前尚未出现有效的治疗手段。小胶质细胞作为一种免疫效应细胞,在神经系统疾病的发生与发展中都发挥着重要作用。间充质干细胞具有免疫调节功能,研究发现,间充质干细胞对于神经系统疾病具有一定的治疗作用,但是具体机制并不明确。研究间充质干细胞对小胶质细胞的功能及其介导的神经炎症的影响与作用机制,将为干细胞应用于神经系统相关疾病的临床治疗提供理论基础。目的1.研究间充质干细胞(MSC)对小胶质细胞吞噬Aβ的影响及机制;2.研究间充质干细胞对LPS刺激的小胶质细胞介导的神经炎症的影响。方法1.利用Aβ刺激小胶质细胞并通过MSC条件培养基处理,研究MSC对小胶质细胞吞噬Aβ的影响。分别通过CCK-8、PI染色、AnnexinV染色检测小胶质细胞活力、周期与凋亡情况;并通过荧光标记检测小胶质细胞对Aβ的吞噬情况,通过Western blot检测小胶质细胞中Aβ降解酶以及自噬相关蛋白的表达。2.利用LPS刺激小胶质细胞并通过MSC条件培养基处理,研究MSC对体外培养的小胶质细胞炎症反应的影响。利用腹腔内注射LPS的方法建立小鼠体内炎症模型,通过尾静脉移植MSC对小鼠进行细胞移植治疗,研究MSC移植对神经炎症的影响。分别通过CCK-8、PI染色、AnnexinV染色检测小胶质细胞活力、周期与凋亡情况。通过荧光标记染色检测MSC对小鼠脑部IBA1阳性小胶质细胞激活情况的影响;通过ELISA检测小鼠血清中炎症因子的表达情况;通过Western blot检测小鼠脑组织NOS2和LC3表达的影响。结果1.间充质干细胞通过调节小胶质细胞Aβ降解酶和自噬相关蛋白的表达来保护小胶质细胞免受Aβ诱导的细胞凋亡,并促进小胶质细胞对Aβ的吞噬作用,此外,MSC-CM通过作用于小胶质细胞来保护神经元细胞免于Aβ诱导的细胞凋亡。今后的研究应着手于筛选MSC-CM调节小胶质细胞自体吞噬继而促进Aβ降解的具体因素。2.间充质干细胞能够在体内外抑制LPS诱导的小胶质细胞的增殖与激活,降低小胶质细胞的凋亡水平,并在一定程度上促进小胶质细胞炎症因子的表达,MSC影响神经炎症的作用可能是通过调节小胶质细胞的自噬功能来实现的。结论1.间充质干细胞通过调节小胶质细胞中Aβ降解酶和自噬相关蛋白的表达来促进小胶质细胞吞噬Aβ。2.间充质干细胞通过调节自噬调节蛋白LC3和一氧化氮合酶NOS2的表达抑制小鼠体内小胶质细胞的激活。