白蜡虫(Ericerus pela Chavannes)是我国具有重要经济价值的资源昆虫,其2龄雄幼虫所分泌的白蜡是一种天然高分子化合物,被广泛应用于机械、医疗、食品、化妆品等诸多领域。研究表明,不同生物体内存在保守的蜡酯合成途径,在不同生物中,蜡酯最终都是在蜡酯合酶(wax synthase,WS)的催化下由长链脂肪酸和长链脂肪醇通过酯化反应形成的,因此,WS是催化蜡酯合成最关键的酶。本研究在前期鉴定到白蜡虫ws基因的基础上,围绕基因表达动态、基因体内功能和体外活性,采用实时荧光定量PCR技术(Real-time Quantitative PCR,RT-qPCR)、昆虫细胞表达、RNA干扰(RNA interference,RNAi)等方法,分析了白蜡虫ws在不同虫态、不同组织的表达情况,验证了白蜡虫ws基因表达动态与白蜡虫泌蜡特点一致,ws基因沉默导致白蜡虫泌蜡量显著降低,WS体外表达具有生成蜡酯的活性,主要结果如下:(1)对白蜡虫雌雄虫不同时期ws基因进行检测发现,ws基因在整个2龄雄幼虫都上调表达,尤其是在2龄雄幼虫前期;对不同组织进行检测发现,ws基因在雄虫表皮的表达量明显高于其他组织器官,与白蜡虫泌蜡特点一致;(2)体外合成了ws dsRNA进行RNA干扰,经RT-qPCR检测,相比于空白对照和gfp(Green Fluorescent Protein)dsRNA对照,RNA干扰后白蜡虫雄幼虫体内ws表达下调,RNA干扰后发现ws实验组相对于空白对照组和gfp dsRNA对照组单头泌蜡量降低;(3)利用昆虫-杆状病毒表达系统将白蜡虫ws基因在BmN家蚕细胞中表达,Western Blot表明,WS表达成功,且表达量在转染36小时时较高;(4)加入底物24酯酰辅酶A和24C脂肪醇,利用表达产物进行体外酶活反应,HPLC检测产物有酯的生成。以上研究表明,鉴定到的白蜡虫ws基因是白蜡虫泌蜡的关键酶基因,对于研究白蜡虫泌蜡机理具有重要意义。