胡桃楸、杭白菊和桑黄化学成分及其抗炎作用研究

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本论文对两种药用植物胡桃楸(Juglans mandshurica)和杭白菊(Chrysanthemum morifolium)及一种药用真菌桑黄(Phellinus igniarius)的化学成分及其抗炎活性进行了研究。1.胡桃楸(Juglans mandshurica Maxim.)为胡桃科胡桃属植物,广泛分布于东北亚地区。其化学成分丰富,具有抗氧化,抗肿瘤,抗炎症,抗HIV,抗寄生虫等活性。为了进一步研究胡桃楸的活性物质基础,本研究利用各种色谱分离技术,对胡桃楸根的乙酸乙酯萃取部分及正丁醇萃取部分分别进行了系统分离和纯化,并通过波谱学分析方法鉴定出24个化合物,其中包括1个新化合物:(S)-(-)-3-(8-hydroxy-1,4-dioxo-1,4-dihydronaphthalen-2-yl)-3-(4-hydroxy-3-methoxy pheny)-propionic acid methyl ester(4),其余 23 个已知化合物分别为:2,3-dihydro-5-hydroxy-1,4-naphthalenedionen(1)、(4S)-4-hydroxy-α-tetralone(2),(S)-regiolone(3),2-ethoxy juglone(5),3-ethoxy juglone(6),2-methoxy juglone(7),(R)-8-hydroxy-atetralone-O-β-D-glucopyranoside(8),5-(β-D-glucopyranosyloxy)-3,4-dihydro-4,8-dihydr oxy-1(2H)naphthalenone(9),(4S)-4-hydroxy-α-tetralone-4-O-β-D-glucopyranoside(10),4,5,8-trihydroxy-α-tetralone-5-O-β-D-glucopyranoside(11),4,5,8-trihydroxy-α-tetralone-5-O-β-D-[6’-O-(3",5 "-dimethoxy-4"-hydroxybenz-oyl)]glucopyranoside(12),rhoiptelol C(13),(+)-dihydrodehydrodiconiferylalcohol(14),diarylheptanone glucoside(15),(2R,3R,4S)-lyoniresinol-3α-O-β-D-glucopyranoside(16)、3,3’-di-O-methylella-gicacid-4’-O-β-D-xylopyranoside(17),p-hydroxyphenethyl-β-D-glucoside(18),6-O-(4’-hydroxy-3’,5’-dimethoxybenzoyl)-D-glucopyranose(19),ligustroside(20),oleoeuropein(21),maniladiol-3-O β-D-glucopyranoside(22),3α-O-β-D-glucopyranoside-24-methoxy-olea-12-ene-22-ketone(23),(2α,3β,4α)-2,3,23-trihydroxyolean-12-en-28-oic acid(24)。其中,化合物 8、17、20、23 是首次从胡桃属中分离得到,化合物12和24是首次从胡桃科中被报道。2.杭白菊是菊科植物菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)的干燥头状花序,主产于浙江侗乡,是国家首批药食同源植物,含有丰富的营养成分和活性物质,具有心血管保护、降血脂、血糖、血压、抗氧化、抗癌、抗炎、神经保护、肝保护等多种药理活性。为了深入研究其化学成分及抗炎活性,利用各种柱层析法,对杭白菊二氯甲烷和乙酸乙酯萃取层的合并部分及正丁醇萃取部分分别进行分离、纯化,并通过波谱学分析方法鉴定出24个化合物,其中包括一个新化合物:β-D-glucopyranosyl-15α-hydroxyl-18-demethyl-ent-16-kauren-19-oate(25),其余 23 个已知化合物分别是 quercetin(26),luteolin(27),apigenin(28),artemetin(29),5,3’,4’-trihydroxyl-3,6,7-trimethyl flavones(30),apigenin-7-O-β-D-glucoside(31),acacetin-7-O-β-D-glucoside(32),luteolin-7-O-β-D-glucoside(33),diosmetin-7-O-β-D-glucoside(34),apigenin-7-O-β-D-rutinoside(35),acacetin-7-O-β-D-rutinoside(36),genistein-7-O-β-D-glucoside(37),hesperetin-7-O-β-D-glucuronide(38),eriodictyol-7-O-β-D-glucoside(39),homoeriodictyol-7-O-β-D-glucoside(40),eriodictyol-7-O-β-D-rutinoside(41),bis(2-ethylhexyl)phthalate(42),3,4-di-O-caffeoylquinic acid(43),3,5-dicaffeoylquinic acid methyl ester(44),trans caffeic acid methylate(45),salicylis acid(46),β-sitosterol(47),daucosterol(48)。化合物35、39、40是首次从杭白菊中分离得到,化合物25、30、37、41、42、45是首次从菊属中分离得到。3.桑黄(Phellinus igniarius)是担子菌亚门多孔菌科针层菌属的一种珍贵的药用真菌,主要分布于东亚地区及中国东北地区、云南,四川等地。桑黄子实体具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎、神经保护及肝保护作用及扩血管活性。为了明确其活性成分及合理利用该药用菌类资源,本研究利用各种柱层析的方法,对桑黄的二氯甲烷萃取部分进行了分离及纯化,并通过波谱学分析方法共鉴定出19个化合物(49-67),分别为 sulfurenic acid(49),eburicoic acid(50),cycloeucalenol(51),lupeol(52),nepetidin(53),betulin(54),betulic acid(55),23-hydroxybetulinic acid(56),3β-acetyloleanolic acid(57),8,9-epoxyergosta-5,22-dien-3β,15-diol(58),daucosterin(59),5α,6β-dihydroxydaucosterol(60),taxifolin(61),caesalpiniaphenol D(62),3,4-dihydroxybenzalacetone(63),4-acetopyrocatechol(64),protocatechualdehyde(65),pyrocatechol(66)和 trehalose(67)。其中化合物52和63是首次从木层孔菌属分离得到,化合物49、51、53、56-58和60-62是首次从多孔菌科分离得到。为了进一步研究三种植物中分离得到的单体化合物的抗炎作用,采用荧光素酶报告基因实验方法检测化合物1-67对TNF-α诱导的NF-κB转录活性的作用;同时,利用LPS诱导的RAW 264.7细胞建立体外炎症模型,研究不同给药浓度(10 μM、30μM、100 μM)对TNF-α、IL-6、NO等炎症因子的抑制作用,结果表明,化合物 13、19、20、21、34、39、44、50、51、53、55、57、58 和 65对NF-κB、TNF-α、IL-6及NO具有较强的抑制作用。
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