诱导型一氧化氮合酶抑制剂对胆管癌细胞生物学行为的影响

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第一部分iNOS在人类胆管癌QBC939细胞系中的表达目的:研究iNOS受体在人胆管癌QBC939细胞系细胞中的表达情况。方法:体外培养人胆管癌QBC939细胞系细胞,免疫荧光法检测iNOS在胆管癌细胞中的表达情况。结果:胆管癌QBC939细胞系中iNOS受体异常表达。结论:人胆管癌QBC939细胞中表达诱导型一氧化氮合酶(iNOS)。证明本课题组选用QBC939细胞系来进行后续体外实验的可行性。第二部分诱导型一氧化氮合酶抑制剂对胆管癌细胞生物学行为的影响目的:探讨诱导型一氧化氮合酶抑制剂(iNOS)对胆管癌细胞生物学行为的影响。方法:不同浓度iNOS抑制剂1400W孵育人胆管癌QBC939细胞24 h后,分别用硝酸还原酶法、MTT比色法检各组细胞中NO浓度与增殖情况,并计算半抑制浓度(IC50);根据IC50值,选择合适浓度的1400W处理QBC939细胞24 h后,分别用划痕试验、Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭情况。以上实验均以未加1400W培养基处理的QBC939细胞为空白对照。结果:与空白对照组比较,各1400W处理组QBC939细胞中NO含量及增殖率均呈浓度依赖性降低(均P<0.05),IC50值为51。24μmol/L;用50μmol/L的1400 W处理QBC939细胞24 h后,实验组的细胞划痕愈合率(61.7%vs.92.3%)和细胞侵袭数(72.7个vs.128.0个)均较对照组明显降低(均P<0.05)。结论:iNOS抑制剂1400w能抑制胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与NO下游的信号分子变化有关。
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