根据龙葵素是生物碱的性质，本课题首先比较研究了用乙醇法与乙醇-乙酸法来提取龙葵素的方法(试验1和2)。然后，比较了高效液相色谱法与比色法测定龙葵素的方法(试验3)。最后，利用小鼠试验测定了其毒性和半数致死量，探讨了其在饲料中的安全阈量。具体的试验内容如下： 试验1：研究了乙醇-乙酸法和乙醇法提取马铃薯中龙葵素的工艺，并用外标法测定其回收率，以评定方法的精确度。研究发现，随着马铃薯量的增加，龙葵素的总量也增加，二者存在着明显的线性相关，其中乙醇-乙酸法测得的龙葵素量与马铃薯量的线性相关的R~2=0.9929(P＜0.01)，乙醇法的为R~2=0.997(P＜0.01)，经过检验两直线回归系数，差异不显著(p＞0.05)。乙醇-乙酸法和乙醇法测得的新鲜马铃薯中龙葵素的回收率分别为87.3％、89.0％(P＜0.05)，干马铃薯中的回收率分别为85.7％、90.9％(P＜0.01)。在精确度的试验中，乙醇-乙酸法的变异系数为8.7％，乙醇法为3.3％。这表明，两种方法都可以准确测定马铃薯中龙葵素的含量，而乙醇法无论在准确性还是操作上均优于乙醇-乙酸法。 试验2：比较研究了乙醇-乙酸法与乙醇法测定饲料中龙葵素的测定方法。研究发现，随着饲料中马铃薯含量的增加，龙葵素的总量也增加，二者存在着明显的线性相关，其中乙醇-乙酸法的R~2=0.9866(p＜0.01)，乙醇法的R~2=0.9942(p＜0.01)。经过两直线回归系数检验，差异不显著(p＞0.05)。在高脂肪含量饲料中，用外标法测得的龙葵素的回收率都很低，用乙醇-乙酸法与乙醇法测得的母猪饲料、鸡饲料和大猪饲料中龙葵素的回收率分别为38.0％～70.8％、41.4％～73.3％。经分析，饲料中脂肪的含量为4.7％～9.3％。经过脱脂处理，使饲料中的脂肪含量降到1.0％左右后，再用两种方法测得的回收率均达到81.6％以上。表明脂肪影响两种方法的测定，饲料需经过脱脂后测定龙葵素才能获得理想结果。 试验3：比较研究了用液相色谱法和比色法测定龙葵索含量的方法。研究发现，高效液相色谱法的保留时间为2.340min，其峰面积和龙葵素含量之间高度相关，其R~2=0.9996(p＜0.01)。比色法测得的吸光度和龙葵素含量之间高度相关，其R~2=0.9968。两直线的高相关系数表明，两种方法都可以用来测定龙葵素的含浙江人学硕卜学位论文量。其回收率都比较高，分别为92.7%、90.9%，且变异系数分别为0.1%、0.2%。 试验4:研究龙葵素对KM小鼠的毒性。选取清洁级KM小鼠130只，体重18一229，雌雄各半。分两次研究了龙葵素的毒性，龙葵素真胃灌注法添加。小鼠自由采食，饮水，观察5天。。第一次试验7组，每组10只，龙葵素的添加剂量为420、3 15、236、177、133、100、75mg/kg BW，高低剂量比值(1:k)为0.75。第二次试验6组，龙葵素的添加剂量分别为747、560、420、315、236、177mg/kg体重，高低剂量比值(1:k)为0.75。第一次试验结果在最高剂量组(420mg/k gBw)，KM小鼠未完全死亡;第二次试验结果在最高剂量组(747mg/kgBw)，小鼠全部死亡。龙葵素对小鼠的肝、脾、肾有毒副作用，并随着剂量的加大，中毒症状越明显;龙葵素对KM小鼠的半数致死量(L氏，)为434mg/kg体重。 综合以上结果，可以得出以下结论:用乙醇法可替代乙醇一乙酸法提取龙葵素，可用比色法测定龙葵素的含量。如果样品中脂肪的含量超过1.0%，应先脱脂后测定。龙葵素对KM小鼠的LD，，为434mg/kg体重。