利玛原甲藻(三亚株)生长和产毒条件的研究

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:likunhoney
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对利玛原甲藻的形态特征、生活史及细胞色素b基因片段进行了研究。通过形态比较,发现本藻株与其他海域分离出来的藻株(长、宽、长宽比、壳孔及边缘孔)有一定差别。对利玛原甲藻的生殖方式进行了较为全面的描述,首次发现其具有横分裂和出芽生殖的方式。   研究了光照周期、温度和起始密度三因素的不同水平组合对利玛原甲藻(三亚株)的生长和产毒的影响,结果显示,光照周期、温度和起始密度均是影响利玛原甲藻生长的显著因子(F>F0.01),影响程度为:起始密度>光照周期>温度,最佳搭配为温度30℃,光周周期12:12h,起始密度2000 cells·mL-1;在对利玛原甲藻产毒影响的各研究因素中,温度是显著因子(F>F0.05),影响程度为:温度>起始密度>光照周期,最佳水平搭配为A1B1C3,即利玛原甲藻产毒最佳条件是温度20℃,光照周期8:16(h),起始密度6000 cells·mL-1。   以改良K配方为基础,分别对利玛原甲藻进行氮浓度限制及磷浓度限制试验(1/2限制、1/4限制、1/8限制、1/16限制、1/32限制),研究在一次性培养过程中,不同氮、磷浓度限制对其生长和产毒的影响。结果发现利玛原甲藻的生长与氮、磷浓度的关系非常密切。利玛原甲藻随着两者浓度的逐级减小生长速率、稳定期细胞密度及叶绿素a含量均逐级减小,形成一个近线性关系的梯度,各组间各检测指标差异显著(P<0.01)。产毒也与两者的浓度密切相关,被限制组单位细胞产毒量除P1/2限制组外,其余各组的毒素含量均比不限制(对照组)的高,而且影响产毒的“分水岭”均在1/16限制,1/16限制和1/32限制组产毒量远大于其他各组。通过比较氮和磷限制条件的生长速率和稳定期细胞密度,发现在同等处理下,磷限制的影响要大于氮限制的;而对单位细胞产毒影响,同等处理下,两者相差不大。   采用显微镜计数法、荧光分光光度法、叶绿素a含量测定法、可见分光光度法对利玛原甲藻(Prorocentrum lima)指数生长期不同浓度的培养液进行细胞密度测定。结果表明后3种细胞计数方法与显微镜计数法相比较,均有较好的线性关系;同时对不同生长期的利玛原甲藻培养液进行测定的结果表明,四种方法的生长曲线一致性良好。比较分析发现,可见分光光度法和荧光法适用于不同细胞密度范围的测定,操作简单、耗时短、不需要破坏样品、适于批量操作,可确定为便捷、有效、可行的P.lima细胞计数法。
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