绞股蓝Gynostemma pemmaphyllum(Thunb.)Makino 为葫芦科 Cucurbitaceae 绞股蓝属Gynostemma的多年生草质藤本植物,全草均可入药,研究证明,绞股蓝中的有效成分主要为皂苷及黄酮等化合物,具有降血脂、降血压、抗氧化、抗癌等药理活性。本实验在绞股蓝中总皂苷及总黄酮提取方法优化的基础上,以安康市平利县不同品系的四倍体绞股蓝(40201、403、404、405、甜味绞股蓝)为材料,系统地研究了不同采收部位、不同生长时期和不同品系这三个因素对总皂苷含量的影响,期望能为绞股蓝的高产栽培、良种选育、适时采收及资源的可持续开发提供理论依据,同时为品种审定工作提供参考;采用HPLC法检测不同省份绞股蓝中5种皂苷成分的含量;并以不同批次绞股蓝标准提取物为实验材料,建立了该提取物的指纹图谱,研究了该提取物体内抗肿瘤活性。通过建立指纹图谱,可有效地对绞股蓝标准提取物的质量进行评价与控制;通过抗肿瘤作用的研究,可更广泛地阐明该药物的药理活性,为充分地开发利用天然药物绞股蓝打下良好的基础。实验的主要结论如下:1.建立了响应面法优化绞股蓝总皂苷及总黄酮的超声提取工艺,根据Box-Benhnken中心组合设计原理,设计四因素三水平,考察了料液比、提取时间、提取温度和超声功率这四个因素对绞股蓝总皂苷和总黄酮得率的影响。优化后的最佳工艺参数分别是料液比1:40 g/mL,提取温度为45℃,超声功率为300 W,提取时间60 min,该工艺使绞股蓝皂苷及黄酮的提取率显著升高,且方法合理可靠,为绞股蓝后续的合理开发利用提供一定的理论基础。2.以安康市平利县5个不同绞股蓝四倍体品系(40201、403、404、405、甜味绞股蓝)为材料,系统地研究了不同生长时期、不同采收部位和不同品系这3个因素对绞股蓝皂苷含量的影响。实验结果表明:新培育出的品系404、405不仅具有长势好,病虫害少、产量高等优点,且其总皂苷的含量比其他三个品种平均高出约0.5倍,由于这两个品种尚未被审定,本研究为品种审定提供理论依据。3.本实验建立了同时测定绞股蓝中5种不同皂苷成分的HPLC方法,该方法具有分离效果好,回收率好,精密度高,仪器要求不高,灵敏度高的特点;不同省份绞股蓝中人参皂苷Rb1、Rb3、Rd、绞股蓝皂苷XLIX、XVII含量差异很大。4.以17个不同批次的绞股蓝标准提取物为材料,建立指纹图谱,并检测该提取物中皂苷XLIX的含量。选择了稳定性较好,吸收强,特征明显的色谱峰的12个共有峰。实验建立的指纹图谱所用方法稳定、可行,符合指纹图谱建立的技术要求,为绞股蓝标准提取物的质量标准提供依据。5.实验研究了绞股蓝标准提取物对移植性小鼠S180肉瘤的作用,分别设定了高(150mg/kg)、中(100mg/kg)、低(50mg/kg)3个剂量组以及模型组、正常对照组和阳性对照组。实验结果表明3个剂量组的瘤重均显著小于模型组(P<0.05),并且抑瘤效果随着剂量的增加而增强。在给药期间标准提取物各剂量组的小鼠精神状况和饮食良好,体重增加快,无明显的毒副作用。本实验为绞股蓝标准提取物药理活性的广泛开发提供了理论依据。