近年来,水产养殖病害对水产品经济造成重大损失,污染水体环境,使水产品质量受到严重冲击。使用抗生素类药物是有效治疗水产动物病害的一种手段,但由于抗生素使用不规范而产生的耐药菌对水生动物病害防治带来了新的问题。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA）是一类常见的人畜共患多重耐药细菌,可以通过养殖环境等途径传播到人,对公共卫生和食品安全构成重大威胁。因此,早期和准确地检测MRSA是指导正确使用抗生素和控制传染性超级细菌传播的关键。近年来,基于群集的规则间隔短回文重复序列相关蛋白（CRISPR/Cas）的生物传感器因其高度的特异性和灵敏度而备受关注。靶核酸和引导RNA（sg RNA）的特异性结合是CRISPR/Cas生物传感器作用的机制。通过简单地改变sg RNA间隔区的序列,它们可以用于检测多种靶标。最近,新发现的小尺寸Cas蛋白Cas14a1（61.52 KDa）被发现具有顺式/反式ss DNA切割活性。目前报道的基于Cas14a1的生物传感器都是利用Cas14a1的反式ss DNA切割能力,使用被荧光基团和淬灭剂（FQ）标记的ss DNA来增强荧光信号,还没有通过抑制荧光信号进行检测的报道。因此,我们提出了一种基于Cas14a1信号关闭的生物传感器。本研究建立了一种基于Cas14a1信号关闭的生物传感器鉴定MRSA,在该传感系统中,设计的单链DNA不仅可以激活Cas14a1-sg RNA复合物的反式切割能力,而且可以作为引物扩增甲氧西林抗性基因（mec A）。以mec A基因组为靶标,结合PCR扩增技术,在MRSA存在下,引物可转化为无PAM位点的ds DNA产物,导致Cas14a1的反式切割活性降低。在优化反应条件之后,对MRSA的检测灵敏度可达到3.08ng/m L并且与敏感型金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,MSSA）等6种模式菌有较高的检测特异性。将此检测平台应用于实际样本中罗非鱼感染的检测,对罗非鱼进行MRSA注射,对照组注射无菌PBS缓冲液,正常养殖10 d后抽取鱼全血样本,提取基因组DNA操作并进行Cas14a1检测,q PCR作为对照,阳性样本检出率可达100%。本研究为基于Cas14a的生物传感平台设计提供了新思路,拓展了CRISPR/Cas14a1系统在抗性基因诊断中的应用。