【摘 要】
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随着水产养殖业的快速的发展,高密度集约化养殖已经成为重要发展趋势。随之而来的养殖环境恶化、抗生素滥用以及疾病频发等问题一直严重困扰着养殖业者。尽管益生菌的广泛应用为解决上述问题带来了一丝曙光,但大量使用商业益生菌制剂会增加养殖成本并挤压利润空间。近年来养殖业者通过大量养殖实践,应用简易的开放式培养工艺将商业购买的益生菌制剂进行扩大培养。其产物进一步应用于对虾高密度养殖,在调控养殖水体水质与养殖动物
【基金项目】
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国家重点研发计划“南海岛礁海参资源养护与生态增养殖技术集成与示范（编号:2020YFD0901104）”； 国家“十三五”海洋经济创新发展示范城市项目“南海微生物资源开发与利用公共服务平台建设（编号:HHCL201813）”； 国家“十三五”海洋经济创新发展示范城市项目“海南热带土著有益菌种微生态制剂系列产品开发与产业链构建（编号
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随着水产养殖业的快速的发展,高密度集约化养殖已经成为重要发展趋势。随之而来的养殖环境恶化、抗生素滥用以及疾病频发等问题一直严重困扰着养殖业者。尽管益生菌的广泛应用为解决上述问题带来了一丝曙光,但大量使用商业益生菌制剂会增加养殖成本并挤压利润空间。近年来养殖业者通过大量养殖实践,应用简易的开放式培养工艺将商业购买的益生菌制剂进行扩大培养。其产物进一步应用于对虾高密度养殖,在调控养殖水体水质与养殖动物健康方面效果优异。时至今日,益生菌制剂二次开放式扩大培养过程中微生物及其代谢产物动态变化规律仍不清楚,限制了进一步理解其产物应用特性及其调控机制。本研究通过综合运用高通量测序和高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）技术对益生菌制剂二次开放式扩培过程的微生物和物质的组成及动态变化进行研究,并通过凡纳滨对虾养殖实验对其应用效果进行初步评价。主要结论如下:（1）开放式简易培养体系无法实现对益生菌制剂中粪肠球菌HN000F7的扩大培养。接种的益生菌制剂改变了早期扩培环境,使扩培体系中细菌群落结构在整个培养时期向不同方向演化。益生菌制剂二次开放式扩培产物微生物优势类群主要有粪肠球菌属（Enterococcus）、芽孢杆菌属（Bacillus）和弧菌属（Vibro）等。而芽孢杆菌属细菌是益生菌制剂二次开放式扩培产物中的绝对优势菌,其相对丰度在扩培过程中不断上升,这可能益生菌制剂二次扩培产物在水质调节方面具备优良效果的原因。（2）益生菌制剂二次扩培产物的代谢物主要由氨基酸、多肽类、脂肪酸类、碳水化合物、醛酮、脂肪酰糖苷等物质组成。扩培过程物质变化剧烈,不同时段存在氨基酸类、糖类、脂肪酸等大量差异代谢物。其中异亮氨酸、水苏糖和丁酸等代谢物具有改善宿主健康和提高宿主免疫力的作用,为益生菌制剂二次扩培产物具备优良应用效果的物质基础。（3）益生菌制剂二次扩培产物可以有效去除养殖系统中的氨氮并部分去除硝酸盐与亚硝酸盐。高通量测序结果表明使用益生菌制剂二次扩培产物可提高养殖系统中的红细菌目（Rhodobacterales）细菌的相对丰度,在净化水质方面发挥了重要作用。本研究明确了益生菌制剂二次扩培产物中微生物与代谢产物组成规律,为益生菌制剂二次扩培产物的合理使用提供科学依据,助力凡纳滨对虾高效健康养殖模式构建。
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